土壤脲酶活性检测试剂盒说明书（可见分光光度法）

产品内容：

试剂一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自备）

试剂二：粉剂×1 瓶，临用前加入 20mL 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存； 

试剂三：液体 65mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四 A 液：液体 2mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四 B 液：液体 8mL×1 瓶，4℃保存；临用前将 A液倒入 B 液中混合，待用；未用完的液体 4℃保存一周。

试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；

标准品：液体 1mL×1 支， 1mg/mL 氮标准液

产品说明：

S-UE 能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

本法以尿素为基质，利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N，生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比。

试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：

分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 630nm，蒸馏水调零
1、培养

2、将培养结束的上清液稀释 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸馏水）若吸光值仍大于 1.5 继续稀释。
3、标准品的准备：吸取适量的标准溶液，稀释至 10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。
4、测氨量

根据标准管的浓度（y）和吸光度（x,减去浓度为 0 的空白管），做标准曲线。

脲酶活力的计算：

根据标准曲线，将ΔA（x）带入公式计算测定中样品的浓度（μg/mL）y 值。

单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。

脲酶活力（U/g 土样）＝y×10×V 反总÷W÷T=80×y

10：稀释倍数；T：反应时间，1d；V 反总：反应体系总体积：2mL；W：样本质量，0.25g。