测定意义

血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力，其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。

测定原理

Fe²⁺与菲洛嗪反应形成紫红色化合物，在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下，血清转铁蛋白可以与Fe³⁺结合，剩余未结合的Fe³⁺可以被还原成Fe²⁺，此时吸光度A1与未结合Fe³⁺数量正相关；酸化后，转铁蛋白结合的Fe³⁺释放，并且进一步被还原成Fe²⁺，此时吸光度A2与总Fe³⁺数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。

自备实验用品及仪器

天平、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。（临用前根据用量将A液和B液按1:1混合）

试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。

测定操作表

血清总铁结合力计算公式

标准曲线：y=0.5478x+0.0281，R²=0.9981

总铁结合能力定义：37℃条件下，每升血清结合 Fe³⁺的μmol数。

总铁结合能力 TIBC（μmol/L）=（△A-0.0281）÷0.5478×V 反总÷V 样= 23.731×(A-0.0281)

V 反总：反应总体积，1.3mL；V 样：反应中样本体积，0.1mL

注意事项

1. 吸光值大于0.8，样品适当稀释再测定，注意计算公式里乘以稀释倍数。

2. 试剂二、试剂三有一定的毒性，操作时请做好防护措施。

3. 检测限为 4.78μmol/L。