货号：LE-1-204

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

γ-氨基丁酸(GABA) 是一种天然活性成分，广泛分布于动植物体内。γ-氨基丁酸是中枢神 经系统中有效的抑制性神经递质，具有降血压、增进脑活力、营养神经细胞、保持神经安定、促进生长激素分泌和保肝利肾等作用，目前在医药和保健食品中已有广泛的应用。

测定原理：

苯酚和次氯酸钠与 GABA 反应， 产生蓝绿色产物， 在 640nm 有最大吸光值。 

需自备的仪器和用品：

分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 

试剂的组成和配制：

提取液：液体 60mL×1 瓶， 4℃保存；

试剂一：液体 10mL×1 瓶， 4℃保存；

试剂二：液体 8mL×1 瓶， 4℃避光保存；

试剂三：液体 10mL×1 瓶， 4℃保存；

试剂四：液体 35mL×1 瓶， 4℃保存。

样品测定的准备：

称取约 0. 1g 样本，加入 1mL 提取液，充分匀浆，转移至 EP 管， 95℃水浴 2h  (盖紧，以防止水分散失) 。冷却后 8000g ，25℃离心 10min ，取上清待测。

测定步骤：

EP 管中加入如下试剂

混匀， 室温静置 5min。

混匀， 95℃水浴 10min ，冰浴冷却。

混匀， 取 1mL 于 1mL 玻璃比色皿，测定 640nm 下吸光值 A 测定与 A 空白，ΔA=A 测定-A 空白，空白管只需测一管。

GABA 活力计算：

标准条件下测定回归方程为 y = 0.053x - 0.0163，R2 = 0.9953；x 为标准品浓度(μmol/mL)， y 为吸光值。

1、按照蛋白浓度计算

GABA(μmol/mg prot)= (ΔA+0.0163)÷0.053÷Cpr

=18.87×(ΔA+0.0163) ÷Cpr

2、按样本鲜重计算

GABA(μmol/g 鲜重)= (ΔA+0.0163)÷0.053÷W

=18.87×(ΔA+0.0163) ÷W

Cpr：样本蛋白质浓度， mg/mL；W：样本质量，g。