货号：LE-1-196

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

产品内容：

试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶（棕色），4℃避光保存。临用前加入 4 mL 无水乙醇，盖紧后充分混匀，再加入 56mL 蒸馏水混匀，避光保存。
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 5mL 蒸馏水，充分溶解。
标准品：粉剂×1 瓶，10mg 半胱氨酸，4℃避光保存。临用前加入 8.26mL 蒸馏水，得到 10μmol/mL的半胱氨酸标准溶液备用。
产品说明：
动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官，故尿中氨基酸的变化最能反应肝、肾的生理状态。另外，氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物，在570nm有特征吸收峰；通过测定570nm吸光度，来计算氨基酸含量。
试验中所需的仪器和试剂：
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
a. 组织样本：称取约 0.1g 组织，加试剂一 1mL，室温下充分研磨，转移到 1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于沸水浴提取 15 min；自来水冷却后，10000rpm，4℃离心 10min，取上清液，待测。
b. 细菌或细胞样本：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3s，间隔 10s，重复 30  次）；10000rpm， 4℃离心 10min，取上清液，待测。
二、测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 570nm，蒸馏水调零。
2、 操作表：

混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温 15 min，冷却后反复颠倒 EP 管数次，将测定管 8000rpm 离心 5min 后取上清，于 570nm 测定吸光值。显色后务必在 30min 内测完。

氨基酸含量计算：

3. 脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应在 570nm 处无吸收峰，因此，570nm 处测定结果不含这两种氨基酸的量。