货号：LE-1-318

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

产品内容：

提取液一：液体 110mL×1 瓶，4℃保存。

提取液二：液体 70mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：浓硫酸 60mL，自备。

试剂二：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

标准品：粉剂×1 支，10mg  半乳糖醛酸，4℃保存。临用前加入 0.943mL 提取液二，配成 50μmol/mL的标准液

产品说明：

果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，不溶性果胶为原果胶（碱溶性果胶）。果胶是一种天然高分子化合物，具有良好的胶凝化和乳化稳定作用，已广泛用于食品、医药、日化及纺织行业。

原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，与原有的可溶性果胶进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物，在 530 nm 处有特征吸收峰。

试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、浓硫酸、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器和蒸馏水。

操作步骤：

一、总果胶的提取：

将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和提取液一体积(mL)为 1: 20 的比列（建议取约 0.05g 样品， 加入 1mL 提取液一），置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min，取出冷却后于 5000g、25℃离心 10min，去掉上清，沉淀中再加入 1mL 提取液一重复操作一次，离心后去上清，沉淀中加入 1mL 提取液二， 置于 90℃恒温水浴锅中水解 1h，取出冷却后于 8000g、25℃离心 15min，取上清液待测。

二、测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 530nm，蒸馏水调零。

2、将 50μmol/mL 标准液用提取液二稀释为 1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 μmol/mL 的标准溶液备用。

3、操作表：

1、 标准曲线的绘制：

以各个标准溶液的浓度为 x 轴，其对应的△A 标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b， 将△A 测定带入方程得到 x（μmol/mL

2、 总果胶含量的计算：

总果胶含量(μmol /g  鲜重)= x×V 提取液二÷W =x÷W

V 提取液二：加入提取液二的体积，1mL；W：样本鲜重，g。

注意事项：

1、 浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热、冷却后再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。

2、 若吸光值超过 0.8，可将样本提取液二进行适当稀释再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。