原果胶含量试剂盒说明书(分光光度法) 

货号：LE-1-320

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶，即原果胶 。 因其具有良好的乳化 、增稠和凝胶作用，在食品 、纺织 、印染 、烟草 、冶金等领域具有较广泛的应用。

测定原理：

原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，并进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红 色化合物，在 530 nm 处有特征吸收峰。

试剂的组成和配制：

提取液一：液体100ml×1 瓶，4℃保存。

提取液二：液体50ml×1 瓶，4℃保存。

标准品：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂一：浓硫酸（自备）

试剂二：液体5ml×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体5ml×1 瓶，4℃避光保存。

自备仪器和用品：

天平 、研钵 、 常温离心机 、可见分光光度计 、水浴锅 、 1ml 玻璃比色皿 、浓硫酸和蒸馏水。

样品处理：

将组织样品捣碎，按照样品质量(g)和提取液一体积(ml)为 1: 20 的比列（建议取约 0.05g 样品，加入 1ml 提取液一），置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min，取出冷却后于 5000g 、 25℃离心 10min，去掉上清， 沉淀中再加入 1ml 提取液一重复操作一次，离心后去上清，沉淀中加入 1ml 提取液二，置于 90℃恒温水   浴锅中水解 1h，取出冷却后于 8000g 、25℃离心 15min，取上清液待测。

测定步骤：

计算公式：

原果胶含量(mg /g  鲜重)= (C 标准×V 标) ×△A2÷△A1÷(W÷V 样总)

=0.25×△A2÷△A1÷W

C 标准：标准品浓度，0.25mg/ml；V 标：反应体系中加入标准品体积，0. 1ml；  V 样总：加入提取液 体积， 1ml； W：样本鲜重，g。

注意事项：

1、空白管和标准管只需测定一次。

2、浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热取出后冷却再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。

3、若吸光值超过 1 ，可将样本提取液进行适当稀释再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。 

4、最低检出限为 10μg/g。