土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）测试盒说明书（可见分光光度法）

产品简介：

S-α-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

S-α-GC 能够催化对-硝基苯-α-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，产物略显黄色，在400nm 有特征光吸收。

试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

产品内容：

试剂一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自备）

试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入 10mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；

试剂三：液体 40mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四：液体 80mL×1 瓶，4℃保存；

标准品：液体 1mL×1 支，5mmol/L 的对硝基苯酚溶液。

标准样品的准备：

取100μL 标准液，加入到 400μL 试剂三中，得到 1mmol/L 标准液，十倍稀释到 100 μmol/L， 用蒸馏水倍比稀释：50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L 做标准液。

操作步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 400nm,蒸馏水调零。

2、加样表：

充分混匀，室温静置 2min 后，400nm 处蒸馏水调零，测定吸光值 A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

标准曲线建立：根据标准管的浓度（y）和吸光度ΔA（A 标准管-A 空白管，x），建立标准曲线。

S-α-GC 活力的计算：根据标准曲线，将ΔA（x）带入公式计算样品浓度（μmol/L）。

单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-α-GC 活力（U/g  土样）＝y×V 反总÷W÷T=0.444×y

T：反应时间，1h=1/24d；V 反总：反应体系总体积：9.25×10-4L；W：样本质量，0.05g。