血锌浓度检测试剂盒说明书（微量法）

货号：LE-2-256

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

锌是必需的微量元素之一 ，在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。

测定原理：

在 pH 8.5~9.5 的溶液中，Zn²⁺与锌试剂生成蓝色配位化合物，在 620nm 有最大吸收峰。

试剂组成和配制：

试剂一：液体20ml×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体15ml×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前 1 天配制，加入 15ml 无水乙醇充分溶解，盖紧，过夜待用。4℃ 保存可稳定约 1 个月，如颜色变黄，则已失效。

标准液：液体×1 支，10μmol/L Zn²⁺标准液。4℃保存。

自备仪器和用品：

离心机 、可调式移液枪 、可见分光光度计/酶标仪 、微量石英比色皿/96 孔板 、蒸馏水和无水乙醇。

测定操作：

1、分光光度计/酶标仪预热 30 min，调节波长到 620 nm，蒸馏水调零。

2、标准液解冻 ：提前取出标准液，置于室温下充分解冻后混匀。

3、空白管 ：取 1.5 ml EP 管，依次加入 100 μl 蒸馏水， 100μl 试剂一 ，混匀；室温， 13000g，离心 10min， 小心吸取上清液 100 μl，加入 0.5 ml EP 管，加入 100μl 试剂二，100μl 试剂三，充分混匀后 13000g 离心取 上清，吸取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，620 nm 测定吸光度，记为 A 空白管。

4、标准管：取 1.5 ml EP 管，依次加入 100 μl 标准液，100 μl 试剂一 ，混匀；室温，13000g，离心 10min， 小心吸取上清液 100 μl，加入 0.5 ml EP 管，加入 100μl 试剂二，100μl 试剂三，充分混匀后 13000g 离心取  上清，吸取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，620 nm 测定吸光度，记为 A 标准管。

5、测定管：取 1.5 ml EP 管，依次加入 100 μl 血清，200 μl 试剂一 ，混匀；室温，8000g，离心 10min，小 心吸取上清液 100 μl，加入 0.5 ml EP 管，加入 100μl 试剂二，100μl 试剂三，充分混匀后 13000g 离心取上 清 ，吸取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板，620 nm 测定吸光度，记为 A 测定管。

注意 ：空白管和标准管只需测定一次。

血锌浓度计算公式：

血锌浓度 (μ mol/L）=C 标准液×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)

= 10×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)

C 标准液：10 μ mol/L Zn²⁺

注意事项：

1、试剂三需提前一天配制，如变黄色则不能再使用。

2、加入试剂三混匀后，要在 30 min 内完成该管测定。

3、最低检出限为 1μ mol/L。