植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒说明书（分光光度法）

货号：LE-1-185

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

原花青素（ Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。

测定原理：

在酸性条件下，植物原花青素 A 环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物， 在 500nm 处有特征吸收峰，测定 500nm 光吸收值可计算原花青素的含量。

试剂组成和配制：

提取液：60%乙醇，自备，4℃保存。

试剂一：液体 8%盐酸 20mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂 0.2g×1 瓶 ，4℃避光保存，临用前加 20mL 甲醇溶解。 

测定工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合。

空白工作液：临用前按照用量将试剂一和甲醇按照 1:1 混合。

自备仪器和用品：

天平 、 常温离心机 、可见分光光度计 、 1 ml 玻璃比色皿 、蒸馏水 、盐酸 、无水乙醇和甲醇。

OPC 提取：

称取约 0. 1g 样本，加入 2ml 提取液，匀浆后，60℃振荡提取 2h，10000g，25℃, 离心 10min，取上清待测。

测定操作表

OPC 计算公式：

标准曲线：y=0.0194x+0.0006，R²=0.999

OPC 含量（mg /g  鲜重）=(ΔA-0.0006）÷0.0194×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)×10^-3

= 0.515×(ΔA -0.0006 ) ÷ W

V 样总：加入提取液体积，2ml；V 反总：反应总体积，1ml；V 样：反应中样品体积，0.2ml； W：样品 质量，g

注意事项：

1、配制好的试剂二应尽快使用，4℃保存时间不超过一个月。

2、 吸光度变化应该控制在 0.05~0.8 之间 。否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。

3、最低检出限为 10μg/g。