植物铵态氮试剂盒说明书（分光光度法）

货号：LE-1-309

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

氮素是构成生物体的一种必需元素，自然界中的氮素循环包括许多转化作用。空气中的氮气 被固氮微生物及植物与微生物的共生体固定成氨态氮，经过硝化微生物的作用转化成硝态 氮，后者被植物或微生物同化成有机氮化物，植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。

测定原理

铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，在 625nm 处有特 征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。

试剂组成和配制

提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 15mL 蒸馏水溶解，现配现用。

试剂二：液体 30mL×1 瓶，4℃避光保存。

样本处理

按照样本质量（g）：提取液体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 新鲜样本，加入 1mL 提取液）室温匀浆后，12000g  ，4℃离心 10min，取上清液待测。

测定操作表

1、分光光度计预热 30min，调节波长至 625nm，蒸馏水调零。

2、操作表

计算公式

标准曲线：y= 0.0374x - 0.0623，R2= 0.9989；x 为标准品（NH4+）浓度μg/mL，y为吸光值△A。

NH4+—N 含量(μg/g 鲜重）=  (△A+0.0623）÷ 0.0374÷W×14÷ 18 

=20.8×  (△A+0.0623）÷W

W：样本质量，g；14 ：N 的分子质量；18 ：NH4+ 的分子质量。

注意事项

1、试剂一必须避光低温保存，配制好的试剂一 4℃保存不能超过 20 天。

2、提取好的待测液尽快测定，低温保存不得超过 24 小时。