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地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:蛋白含量检测试剂盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:YX-C-C202,YX-W-C202

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-C202

BCA蛋白法含量测试盒

可见分光光度法

50/48

100

YX-W-C202

BCA蛋白法含量测试盒

微量法

100管/96

190

BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书(微量法)

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定,确保蛋白浓度在20-2000μg/ml内。
货号:YX-W-C202
规格:100T/96S
产品内容:
试剂A:液体 20ml×1瓶,4℃保存。

试剂B:液体 1ml×1支,4℃保存。

标准品0.5mg/mL:液体1ml×1支,-20℃保存。

产品说明:
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。测定原理: 碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将Cu2+还原成Cu+;2分子的BCA与Cu+结合,生成紫色络合物,在540-595nm有吸收峰,562nm处吸收峰最强。
自备仪器和用品:
台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸馏水。
工作液配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×0.2mL),将试剂A和B按照50:1的比例混合,盖紧后充分混匀。
操作步骤:
一、样品中可溶性蛋白质提取:
1. 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。
2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水),冰浴匀浆, 10000rpm,4℃离心10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)
3. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000rpm,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
二、测定操作:
1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到562 nm,蒸馏水调零。
2. 工作液置于60℃水浴预热30 min。

 

空白管

标准管

测定管

蒸馏水(μL)

4

 

 

标准品(μL)

 

4

 

待测液(μL)

 

 

4

工作液(μL)

200

200

200


混匀后置于60℃保温30min,于微量玻璃比色皿/96孔板,于562nm处测定吸光值A,分别记为A空白管、A标准管、A测定管。

注意:空白管和标准管只需要做一次。

三、计算公式:

Cpr (mg/mL)= C标准品×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
=0.5×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
注意事项:
1. BCA 法蛋白含量测定试剂盒,适用于测定蛋白浓度在20-2000μg/ml 样品。测定前取1-2 个样做预实验,样品蛋白含量太高的话,请稀释至相应浓度范围内,以确保测定的准确性。
2. 待测样品蛋白提取可用生理盐水、蒸馏水或PBS 提取。
3. 由于受测定温度及时间等的影响,请严格按照给定条件测定。



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