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产品名称:土壤纤维素酶(S-CL)测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:YX-C-B936,YX-C-B936

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-B936

土壤纤维素酶(S-CL)测试盒

可见分光光度法

50管/24样

580

YX-W-B936

土壤纤维素酶(S-CL)测试盒

微量法

100管/48样

1100

土壤纤维素酶(S-CL)活性检测试剂盒说明书(可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。  

产品说明:
S-CL主要来源于土壤微生物,S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。本产品采用3.5-二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

产品内容:
试剂一:甲苯10mL×1 瓶,4℃保存;(自备) 

试剂二:液体15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:液体50mL×1 瓶,4℃保存; 试剂四:液体15mL×1 瓶,4℃保存;
标准品:粉剂×1 支,4℃保存,含 10mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入 1mL 蒸馏水溶解,配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液备用,4℃可保存 1 周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。

自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

操作步骤:
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、加样表和测定步骤:

对照管

测定管

标准管

空白管

风干土样(g

0.25

0.25

-

 

试剂一(μL)

125

125

-

 

 

煮沸15min(盖紧)

振荡混匀,室温放置15min

-

 

试剂二(μL 

250

250

-

 

试剂三(μL 

1000

1000

-

 

蒸馏水(μL 

250

250

-

 

振荡混匀,40水浴糖化1h 后,煮沸15min(盖紧,防止水分散失),得糖化液

 

 

糖化液(μL)

50

50

-

 

标准液(μL)

-

-

50

 

蒸馏水(μL)

 

 

 

50

试剂四(μL)

150

150

150

150

混匀, 沸水浴中煮沸显色15min(盖紧,防止水分散失),冷却

蒸馏水(μL

1050

1050

1050

1050

混匀,540nm 处蒸馏水调零,测定吸光值A,样品管计算ΔA=A测定管-A对照管

标准曲线的建立:

540nm 处蒸馏水调零,读标准管吸光值ΔA=A 标准管-A 空白管。以浓度(y) 为纵坐标,吸光度ΔA(x)为横坐标建立标准曲线。

活力计算:
根据标准曲线,将样品ΔA 带入公式中(x)计算样品浓度 y(mg/mL)。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。S-CL 活力(U/g)=y×V 反总÷W÷T =156×y
T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:1.625mL;W:样本质量,0.25g。
注意事项:若样品测定管吸光度过小(0.02),可延长反应时间,即 40℃水浴糖化时间,最后计算时加以换算即可。




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