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产品名称:土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)测试盒

产品规格:100管/96样,50管/48样

产品货号:YX-C-S-GLS,YX-W-S-GLS

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-S-GLS

土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)测试盒

可见分光光度法

50/48

650

YX-W-S-GLS

土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)测试盒

微量法

100管/96

1200

土壤谷氨酰胺酶(solid-glutaminase, S- GLS)  活性测定试剂盒说明书(分光光度法) 

规格:50 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和 氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

测定原理:

S-GLS 催化谷氨酰胺水解成 L-谷氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其 酶活性。

需自备仪器和用品:

台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、 甲苯、冰和双蒸 水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体×1 瓶,8 mL ,4  ℃保存;

试剂二:粉剂×1 瓶,4  ℃保存;临用前加入 25mL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 4℃ 保存;

试剂三:液体×1 瓶,30 mL ,常温保存;

试剂四:液体×1 瓶,12 mL ,常温保存;

试剂五:液体×1 瓶,8 mL ,常温保存;

试剂六:液体×1瓶,6 mL ,常温避光保存。

测定步骤:

1 、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 420nm ,蒸馏水调零。

2 、样品测定(在 EP 管中加入下列试剂):

试剂名称

测定管

对照管

样本(g

0. 1

 

甲苯(uL

25

25

振荡混匀,室温放置 15min

试剂一(uL

100

100

试剂二(uL

400

400

混匀,37℃水浴 2  小时

试剂三(uL

525

525

混匀,8000 g ,25℃离心 10 min;取上清液,依次加入下列试剂

上清液(uL

650

650

试剂四(uL

150

150

试剂五(uL

100

100

试剂六(uL

100

100

混匀,室温静置 15min ,420nm 处读取测定管和对照管吸光值,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管。

注意:试剂六如出现沉淀,静置后取上清使用。

酶活性计算:

标准条件下测定的回归方程为 y = 3.8488x +0.0057;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光 值 A。

单位定义:每 g 土样每 min 催化谷氨酰胺生成 1nmol  氨定义为一个酶活力单位。S-GLS(nmol/min/g  土样)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V 反总÷W÷T × 1000

=2.27×(ΔA -0.0057)÷W

V 反总:反应体系总体积:1.05mL;T:反应时间,2h= 120min;W:样本质量,g; 1000, μmol 到 nmol 换算系数。

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