产品名称:土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)测试盒
产品规格:100管/96样,50管/48样
产品货号:YX-C-S-GLS,YX-W-S-GLS
免费咨询:0551-66107970
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-S-GLS |
土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/48样 |
650 |
YX-W-S-GLS |
土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)测试盒 |
微量法 |
100管/96样 |
1200 |
规格:50 管/48 样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和 氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
测定原理:
S-GLS 催化谷氨酰胺水解成 L-谷氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其 酶活性。
需自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、 甲苯、冰和双蒸 水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1 瓶,8 mL ,4 ℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4 ℃保存;临用前加入 25mL 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 4℃ 保存;
试剂三:液体×1 瓶,30 mL ,常温保存;
试剂四:液体×1 瓶,12 mL ,常温保存;
试剂五:液体×1 瓶,8 mL ,常温保存;
试剂六:液体×1瓶,6 mL ,常温避光保存。
测定步骤:
1 、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 420nm ,蒸馏水调零。
2 、样品测定(在 EP 管中加入下列试剂):
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
样本(g) |
0. 1 |
|
甲苯(uL) |
25 |
25 |
振荡混匀,室温放置 15min |
||
试剂一(uL) |
100 |
100 |
试剂二(uL) |
400 |
400 |
混匀,37℃水浴 2 小时
试剂三(uL) |
525 |
525 |
混匀,8000 g ,25℃离心 10 min;取上清液,依次加入下列试剂
上清液(uL) |
650 |
650 |
试剂四(uL) |
150 |
150 |
试剂五(uL) |
100 |
100 |
试剂六(uL) |
100 |
100 |
混匀,室温静置 15min ,420nm 处读取测定管和对照管吸光值,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管。
注意:试剂六如出现沉淀,静置后取上清使用。
酶活性计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 3.8488x +0.0057;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光 值 A。
单位定义:每 g 土样每 min 催化谷氨酰胺生成 1nmol 氨定义为一个酶活力单位。S-GLS(nmol/min/g 土样)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V 反总÷W÷T × 1000
=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V 反总:反应体系总体积:1.05mL;T:反应时间,2h= 120min;W:样本质量,g; 1000, μmol 到 nmol 换算系数。
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