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产品名称:植物类胡萝卜素测试盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:YX-C-LHLBS,YX-W-LHLBS

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-LHLBS

植物类胡萝卜素测试盒

可见分光光度法

50管/48样

200

YX-W-LHLBS

植物类胡萝卜素测试盒

微量法

100管/96样

400

物类胡萝 卜素含量检测试剂盒说明书见分光光度法

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

规格:50T/48S

产品简介:

类胡萝 卜素( carotenoid)是一类重要的天然色素的总称,普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻 类的黄色、橙红色或红色的色素之中。类胡萝 卜素是体内维生素 A 的前体,同时还具有抗氧化、免 疫调节、抗癌、减轻心血管疾病及着色剂等作用。

植物的类胡萝 卜素存在于各种黄色质体或有色质体内;如黄叶,黄色花卉,黄色和红色的果实 和黄色块根等组织,样本通过溶剂萃取,分离提取类胡萝 卜素,在 440± 10 nm 处有特殊吸收峰。

大部分高等植物和藻类微生物的叶绿体内也含有类胡萝 卜素,类胡萝 卜素主要吸收蓝紫光,而 叶绿素 a 和叶绿素 b 既吸收红光又可吸收蓝紫光。所以针对含叶绿体的组织,为排除叶绿素 a 和叶 绿素 b 对类胡萝 卜素的干扰,根据经验公式先计算出叶绿素 a 和叶绿素 b 的含量,再进一步得出类 胡萝 卜素的含量;针对不含叶绿素的组织可以直接根据类胡萝 卜素的经验消光系数进行计算

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、台式离心机、1mL 玻璃比色皿、天平、可调式移液枪、研钵/匀浆器、10 mL 离心管/试管、蒸馏水和丙酮。

产品内容:

提取液: 自备,80%丙酮,即将丙酮:蒸馏水 (V:V) =4:1 混合待用。

试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。

操作步骤:

一、样本制备:

1 、新鲜植物叶片 (去掉中脉) 或其他组织用蒸馏水洗干净,然后吸干表面水分,称取约 0.1 g, 剪碎放入研钵或匀浆器中。

2 、加入1 mL 蒸馏水,少量试剂一(约 10 mg) ,在黑暗或弱光条件下充分研磨,转入 10 mL 离心管或试管中。

3 、用提取液冲洗研钵或匀浆器,将所有冲洗液转入 10mL 离心管或试管中,用提取液定容至10 mL ,置于黑暗条件或者包上锡箔纸浸提 3 h  (期间可以颠倒混合 2 次) ,观察底部组织残渣接近 于白色则提取完全,若组织残渣未完全变白,继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。

、测定步骤:

A 、黄色或其他绿色组织 (不含叶绿体) 类胡萝卜素含量测定步骤: 

1 、分光光度计预热 30 min 以上,调节波长至 440 nm ,用提取液调零。

2 、取上层浸提液 1 mL 于 1 mL 玻璃比色皿中,测定 440 nm 处吸光值,记为 A440。 

B 、新鲜植物叶片或其他绿色组织 (含叶绿体) 类胡萝卜素含量测定步骤:

1 、分光光度计预热 30 min 以上,调节多波长至 470 nm 、646 nm 和 663 nm ,用提取液调零。

2、取上层浸提液 1 mL 于 1 mL 玻璃比色皿中,测定 470 nm 、646 nm 和 663 nm 处吸光值,分别记为 A470 、A646 和 A663。

注意:

若上层浸提液有残渣,可吸取 1.2 mL 上层浸提液置于 1.5 mL 棕色EP 管,常温下 4000 r/min 离心 5 min ,再取上清液检测。

三、类胡萝 卜素含量的计算

A 、黄色或其他非绿色组织 (不含叶绿体) 类胡萝 卜素含量的计算公式:

类胡萝 卜素含量 ( mg/g 鲜重) =A440÷  ( ε×d) ×V  样总×1000÷W×F

=0.04×A440×F÷W

V 样总:提取液总体积,0.01L;1000:单位换算系数,1g =1000mg;ε :类胡萝 卜素经验消光系数,250 L/g/cm;d :比色皿光径,1 cm;F :稀释倍数;W :样本质量,g。

B 、新鲜植物叶片或其他绿色组织 (含叶绿体) 类胡萝 卜素含量的计算公式:

Ca    ( mg/ L) =12.21×A663-2.81×A646

Cb   ( mg/ L) =20.13×A646-5.03×A663

类胡萝 卜素浓度:Cc    ( mg/ L) =  (1000×A470-3.27×Ca- 104×Cb ) ÷229

=4.367×A470-0.014×Ca-0.454×Cb

类胡萝 卜素含量 ( mg/g 鲜重) =Cc ×V 提取×F÷W =0.01×Cc ×F÷W

V 提取:提取液体积,0.01L;F :稀释倍数;W :样本质量,g。

注意事项:

1.   若不确定组织中有无叶绿素影响,可取样本提取液采用分光光度计在波长 400-700 nm 下进行扫 描,看波长 640-670 nm 之间有无波峰,有波峰则为有叶绿素,反之则无。

2.   当 A 超过 1 时,建议将样本用提取液稀释后再进行测定,计算公式中乘以稀释倍数 F。

3.   为了避免色素见光分解,操作时应尽量避光,研磨或匀浆时应尽量缩短时间。

4.   提取液易挥发,操作时做好防护措施。

5.   测定大量样本时,注意比色池中用来调零校正的比色皿中的提取液的液面位置,防止挥发造成 误差。


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