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产品名称:大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β) ELISA试剂盒

产品规格:48T/96T

产品货号:LE-B1737

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本试剂盒仅限于科研使用请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。

严格按照实验说明书操作,并佩戴一次性手套和口罩。

以下文字为产品简介,详情以说明书为准,可QQ或联系在线客服索取。

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检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被抗体的微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

试剂盒规格及配置  

名称

96孔配置

48孔配置

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

自备物品

①.酶标仪(450nm)

②.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

③.37℃恒温箱

操作步骤

①.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

②.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

③.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

④.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

⑤.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗

机洗板)。

⑥.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

⑦.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。

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