中性木聚糖酶(NEX)活性检测试剂盒说明书（可见分光光度法）
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
产品内容：
缓冲液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存
标准品：粉剂×1 支，4℃保存。10mg 木糖，临用前加入 667μL 蒸馏水配成 100μmol/mL 的标品溶液，再稀释 50 倍即得2μmol/mL 的木糖标准溶液，备用。

产品说明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半 纤维素酶， 可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，中性木聚糖酶(NEX)一般分离自最适生长 pH 为 6-8 的微生物。
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与 3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比， 通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 NEX 活力。

试验中所需的仪器和试剂：
低温离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：

一、粗酶液提取：
1、细胞或微生物样品发酵液的制备：
发酵液于 8000rpm，4℃，离心 15min，取上清，置于冰上待测。2、组织：
称取约 0.1g 组织，加入 1mL 缓冲液，冰上充分研磨。8000g，4℃离心 15min，取上清，置冰上待测。
3、酶干粉：
称约 1mg，加缓冲液 1mL，震荡充分溶解。

二、测定步骤：
1、 可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。
2、 将上清液/酶溶液用蒸馏水稀释十倍后置冰上待测。
3、 操作表：

三、NEX 计算公式

注意事项：

1. 吸光度变化应该控制在 0.01~1.5 之间，否则加大样品量或稀释样品，注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变；也可以延长或者缩短反应时间。
2. 试剂盒 2-8℃保存，保质期 3 个月，建议尽快使用。