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产品名称:原果胶含量测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:YX-C-C113,YX-W-C113

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

YX-C-C113

原果胶测试盒

可见分光光度法

50/24

650

YX-W-C113

原果胶测试盒

微量法

100/48

1300

原果胶含量检测试剂盒说明书(可见分光光度法

注意: 正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

产品内容:

提取液一: 液体 110mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二: 液体 70mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一: 浓硫酸 60mL , 自备。

试剂二: 液体 3mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三: 液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。

标准品: 粉剂×1 支, 10mg 半乳糖醛酸,4℃保存。临用前加入 0.943mL 提取液二, 配成 50μmol/mL 的标准液

产品说明:

果胶是植物细胞壁主要组成成分之一,分为水溶性果胶和不溶性果胶,不溶性果胶为原果 胶。原果胶是不溶于水的物质,但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下,加水分解转变成水 溶性果胶,在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。

原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶,并进一步转化为半乳糖醛酸,产物在强酸中与咔唑缩合 生成紫红色化合物,在 530 nm 处有特征吸收峰。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、浓硫酸、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀 浆器和蒸馏水。

操作步骤:

一、原果胶的提取:

将组织样品捣碎,按照样品质量(g)和提取液一体积(mL)为 1: 20 的比列(建议取约 0.05g 样品, 加入 1mL 提取液一),置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min ,取出冷却后于 5000g 25℃离心 10min, 去掉上清,沉淀中再加入 1mL 提取液一重复操作一次,离心后去上清,沉淀中加入 1mL 提取液二, 置于 90℃恒温水浴锅中水解 1h ,取出冷却后于 8000g 25℃离心 15min ,取上清液待测。

二、测定步骤:

1  分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 530nm ,蒸馏水调零。

2 、 将 50μmol/mL 标准液用提取液二稀释为 1 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125 μmol/mL 的标 准溶液备用。

3 、 操作表:

试剂名称

空白管

标准管

对照管

测定管

样本(μL)

-

-

100

100

标准品(μL)

-

100

-

-

蒸馏水(μL)

100

-

-

-

试剂一(μL)

800

800

800

800

混匀、90℃放置 10min ,取出后冷却

试剂二(μL)

-

-

100

-

试剂三(μL)

100

100

-

100

混匀,95℃水浴 5min 后,冷却至室温,取 200µL至微量石英比色皿或 96  板中后测定 530nm 处吸光值,分别记为 A 空白管、A 标准管、A 对照管和 A 测定 管。△A 标准=A 标准管-A 空白管,△A 测定=A 测定管-A 对照管。

三、原果胶含量的计算

1、标准曲线的绘制:

以各个标准溶液的浓度为 x 轴,其对应的△A 标准为 y 轴, 绘制标准曲线, 得到标准方程 y=kx+b, △A 测定带入方程得到 x ( μmol/mL)

2、原果胶含量的计算:

原果胶含量(μmol /g 鲜重)= x×V 提取液二÷W =x÷W

V 提取液二: 加入提取液二的体积,1mL;W:样本鲜重,g。

注意事项:

1、浓硫酸具有强腐蚀性, 操作时需特别注意, 90℃加热、冷却后再打开盖子,以防液体飞溅烧伤。

2、若吸光值超过 0.8,可将样本提取液二进行适当稀释再进行测定, 并在计算公式中乘以稀释倍数。





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