产品名称:原果胶含量测试盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:YX-C-C113,YX-W-C113
免费咨询:0551-66107970
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-C113 |
原果胶测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
650 |
YX-W-C113 |
原果胶测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1300 |
原果胶含量检测试剂盒说明书(可见分光光度法)
注意: 正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
产品内容:
提取液一: 液体 110mL×1 瓶,4℃保存。
提取液二: 液体 70mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一: 浓硫酸 60mL , 自备。
试剂二: 液体 3mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三: 液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
标准品: 粉剂×1 支, 10mg 半乳糖醛酸,4℃保存。临用前加入 0.943mL 提取液二, 配成 50μmol/mL 的标准液
产品说明:
果胶是植物细胞壁主要组成成分之一,分为水溶性果胶和不溶性果胶,不溶性果胶为原果 胶。原果胶是不溶于水的物质,但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下,加水分解转变成水 溶性果胶,在食品、纺织、印染、烟草、冶金等领域具有较广泛的应用。
原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶,并进一步转化为半乳糖醛酸,产物在强酸中与咔唑缩合 生成紫红色化合物,在 530 nm 处有特征吸收峰。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、浓硫酸、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀 浆器和蒸馏水。
操作步骤:
一、原果胶的提取:
将组织样品捣碎,按照样品质量(g)和提取液一体积(mL)为 1: 20 的比列(建议取约 0.05g 样品, 加入 1mL 提取液一),置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min ,取出冷却后于 5000g 、25℃离心 10min, 去掉上清,沉淀中再加入 1mL 提取液一重复操作一次,离心后去上清,沉淀中加入 1mL 提取液二, 置于 90℃恒温水浴锅中水解 1h ,取出冷却后于 8000g 、25℃离心 15min ,取上清液待测。
二、测定步骤:
1 、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 530nm ,蒸馏水调零。
2 、 将 50μmol/mL 标准液用提取液二稀释为 1 、0.5 、0.25 、0.125 、0.0625 、0.03125 μmol/mL 的标 准溶液备用。
3 、 操作表:
试剂名称 |
空白管 |
标准管 |
对照管 |
测定管 |
样本(μL) |
- |
- |
100 |
100 |
标准品(μL) |
- |
100 |
- |
- |
蒸馏水(μL) |
100 |
- |
- |
- |
试剂一(μL) |
800 |
800 |
800 |
800 |
混匀、90℃放置 10min ,取出后冷却 |
||||
试剂二(μL) |
- |
- |
100 |
- |
试剂三(μL) |
100 |
100 |
- |
100 |
混匀,95℃水浴 5min 后,冷却至室温,取 200µL至微量石英比色皿或 96 孔 板中后测定 530nm 处吸光值,分别记为 A 空白管、A 标准管、A 对照管和 A 测定 管。△A 标准=A 标准管-A 空白管,△A 测定=A 测定管-A 对照管。 |
三、原果胶含量的计算
1、标准曲线的绘制:
以各个标准溶液的浓度为 x 轴,其对应的△A 标准为 y 轴, 绘制标准曲线, 得到标准方程 y=kx+b, 将△A 测定带入方程得到 x ( μmol/mL)
2、原果胶含量的计算:
原果胶含量(μmol /g 鲜重)= x×V 提取液二÷W =x÷W
V 提取液二: 加入提取液二的体积,1mL;W:样本鲜重,g。
注意事项:
1、浓硫酸具有强腐蚀性, 操作时需特别注意, 90℃加热、冷却后再打开盖子,以防液体飞溅烧伤。
2、若吸光值超过 0.8,可将样本提取液二进行适当稀释再进行测定, 并在计算公式中乘以稀释倍数。
相关新闻: |
版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司 皖ICP备17006278号-2