产品名称:植物原花青素(OPC)测试盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:YX-C-A508,YX-W-A508
免费咨询:0551-66107970
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-A508 |
植物原花青素(OPC)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
520 |
YX-W-A508 |
植物原花青素(OPC)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1100 |
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
产品内容:
提取液:60%乙醇,自备,4℃保存。
试剂一:11%盐酸 8mL,自备,4℃保存。即 2.4mL 盐酸溶于 5.6mL 蒸馏水
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 8mL 提取液溶解。
工作液:临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合。
标准品:粉剂×1 支, 10mg 原花青素。
产品说明:
花青素是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物, 广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,保健品行业。
在酸性条件下,植物花青素 A 环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在 500nm 处有特征吸收峰,测定 500nm 光吸收值,可计算植物中原花青素的含量。
自备实验用品及仪器:
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水、11%盐酸和60%乙醇。
操作步骤:
一、花青素 提取:
将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.1g,加入 1mL 提取液,用超声提取法进行提取,超声功率 300W,破碎 5s,间歇 8s,提取,30min, 12000rpm,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 1mL,待测。
二、测定操作表:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 500nm,蒸馏水调零。
2、 用提取液将原花青素配制成 10mg/mL 标准液,用提取液梯度稀释为 5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.156、0.078、0.039、0.02、0.01mg/mL 的标准溶液。
3、 操作表
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对照管 |
测定管 |
标准管 |
空白管 |
样本(μL) |
40 |
40 |
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标准溶液(mg/mL) |
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40 |
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工作液(μL) |
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160 |
160 |
160 |
H2O(μL) |
160 |
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40 |
混匀,30℃水浴 30min,立即于微量石英比色皿/96 孔板中检测 500nm 处吸光值,计算∆A 测定 =A 测定管-A 对照管,∆A 标准=A 标准管-A 空白管。空白管只需做一管 |
1、 标准曲线的绘制
以∆A 标准为 y 轴,标准溶液浓度为 x 轴,绘制标准曲线,得到方程 y=kx+b。
2、 花青素 的计算
将∆A 测定带入方程,得到 x(mg/mL)
(1)按样本鲜重计算
花青素 含量(mg/g 鲜重)= x×V 提取÷W=x÷W。
(2)按样本蛋白浓度计算
花青素 含量(mg/mg prot)= x×V 提取÷(Cpr×V 提取)= x÷Cpr
V 提取:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
注意事项:
1、配制好的试剂二应尽快使用,4℃保存时间不超过一个月。
2、吸光度变化应该控制在 0.006-1.2 之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。
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