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产品名称:植物原花青素(OPC)测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:YX-C-A508,YX-W-A508

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法 

规格

售价(元)

YX-C-A508

植物原花青素(OPC)测试盒

可见分光光度法

50/24

520

YX-W-A508

植物原花青素(OPC)测试盒

微量法

100/48

1100

植物花青素含量检测试剂盒说明书微量法

注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

产品内容:

提取液60%乙醇,自备,4℃保存。

试剂一:11%盐酸 8mL,自备,4℃保存。即 2.4mL 盐酸溶于 5.6mL 蒸馏水

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 8mL 提取液溶解。

工作液:临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合。

标准品:粉剂×1 支, 10mg 原花青素。

产品说明:

花青素是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物, 广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,保健品行业。

在酸性条件下,植物花青素 A 环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在 500nm 处有特征吸收峰,测定 500nm 光吸收值,可计算植物中原花青素的含量。

自备实验用品及仪器:

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水、11%盐酸和60%乙醇。

操作步骤:

一、花青素 提取:

将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.1g,加入 1mL 提取液,用超声提取法进行提取,超声功率 300W,破碎 5s,间歇 8s,提取,30min 12000rpm,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 1mL,待测。

二、测定操作表:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 500nm,蒸馏水调零。

2 用提取液将原花青素配制成 10mg/mL 标准液,用提取液梯度稀释为 5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.156、0.078、0.039、0.02、0.01mg/mL 的标准溶液。

3、 操作表

 

对照管

测定管

标准管

空白管

样本(μL)

40

40

 

 

标准溶液(mg/mL)

 

 

40

 

工作液(μL)

 

160

160

160

H2O(μL)

160

 

 

40

混匀,30℃水浴 30min,立即于微量石英比色皿/96 孔板中检测 500nm 处吸光值,计算∆A 测定

=A 测定管-A 对照管,∆A 标准=A 标准管-A 空白管。空白管只需做一管

三、花青素 计算公式:

1、 标准曲线的绘制

∆A 标准为 y 轴,标准溶液浓度为 x 轴,绘制标准曲线,得到方程 y=kx+b。

2 花青素 的计算

∆A 测定带入方程,得到 x(mg/mL)

(1)按样本鲜重计算

花青素 含量(mg/g 鲜重)= x×V 提取÷W=x÷W。

(2)按样本蛋白浓度计算

花青素 含量(mg/mg prot)= x×V 提取÷(Cpr×V 提取)= x÷Cpr

V 提取:加入提取液体积,1 mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。

注意事项:

1、配制好的试剂二应尽快使用,4℃保存时间不超过一个月。

2、吸光度变化应该控制在 0.006-1.2 之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。



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