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产品名称:土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(S-C1)试剂盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-055,LE-2-055

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-055

土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(S-C1)测试盒

可见分光光度法

50/24

650

LE-2-055

土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(S-C1)测试盒

微量法

100管/48

1200

土壤外切- β-1 4-葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(S-C1)试剂盒说明书(可见分光光度法

测定意义:

C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖 链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。

测定原理:

采用3,5-二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

样品测定的准备:

称取约 0.1g 新鲜土样或风干土样,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取 30min,然后 10000g 4℃离心 10min ,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。

2、加样表(在 EP 管中依次加入下列试剂):

试剂名称( μL)

测定管

对照管

样本

50

50

试剂一

500

 

蒸馏水

 

500

混匀,37℃准确水浴 2h

试剂二

1000

1000

混匀, 90℃水浴 10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,测 540nm 下吸光值 A,计 算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-C1 活性计算

标准条件下测定回归方程为 y = 6.4078x - 0.0673;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。 

单位的定义:每 g 土样每分钟催化产生 1 μg  葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(W×V 样÷V 样总)

÷T =14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

1000 1mg/mL=1000ug/mL;V 反总:反应体系总体积,0.55mL; V 样:加入样本体积, 0.05 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min;W:样本质量,g。


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