土壤酸性木聚糖酶（Soil Acidic Xylanase ，S-ACX）测定试剂盒说明书（可见分光光度法）

测定意义

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素 酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进 有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应 用于酿造和饲料工业中，ACX 一般分离自耐酸的真菌，细菌及部分霉菌。

测定原理

ACX 在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，进一步在沸水浴条件下与 3,5-二 硝基水杨酸发生显色反应，在 540nm 处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率，可计算 ACX 活力。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅，可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。

试剂组成和配制

缓冲液：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。

样品处理

新鲜土样风干，过 30-50 目筛。

测定操作表

S-ACX 计算公式

标准曲线：y = 2.5554x - 0.002 ，R² = 0.9983

酶活定义：50℃, pH4.8 条件下，每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量 为一个酶活单位。

S-ACX 活力(μmol/d/g  土样）=  (△A +0.002）÷2.5554×V 反总×10³÷W÷T÷150 = 75.14× (△A +0.002）÷W

V 反总：反应总体积，0.6mL；T：反应时间，1/48d；1000 ：1mmol/L =103μmol/L；150：木 糖分子量。

注意事项

1、保证震荡反应 30min ，使酶与底物充分接触。

2、注意 90℃水浴防止爆开，以免改变反应体系。