产品名称：土壤中性蛋白酶试剂盒
产品规格：50管/24样,100管/48样
产品货号：LE-1-022,LE-2-022
产品报价：
免费咨询：0551-66107970
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价（元） |
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LE-1-022 |
土壤中性蛋白酶测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
650 |
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LE-2-022 |
土壤中性蛋白酶测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1200 |
产品内容：
试剂一：液体20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入10mL 蒸馏水充分溶解待用；
试剂四：液体40mL×1 瓶，4℃保存；
试剂五：液体10mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体2mL×1 支，0.2 μmol/mL 酪氨酸溶液，4℃保存。
产品说明：
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤中性蛋白酶在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。中性条件下，土壤中性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm 有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿、蒸馏水、50目筛（或更小）。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
操作步驟：
1、分光光度计预热30min 以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。
2、样本测定：
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试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
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风干土样（g） |
0.1 |
0.1 |
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试剂一（μL） |
100 |
100 |
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试剂二（μL） |
200 |
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混匀后，37℃反应24h，期间振荡5-6 次，使土样与反应液充分接触。 |
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试剂三（μL） |
200 |
200 |
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试剂二（μL） |
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200 |
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混匀，10000rpm 室温离心10min，取上清液 |
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上清液（μL） |
220 |
220 |
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标准液（μL） |
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220 |
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蒸馏水（μL） |
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220 |
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试剂四（μL） |
650 |
650 |
650 |
650 |
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试剂五（μL） |
130 |
130 |
130 |
130 |
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混匀，40℃水浴 10min，10000rpm 室温离心 10min，取上清液于 680nm 下读取各管吸光值 A， 分别记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管，计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。 |
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注意：标准管、空白管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
土壤中性蛋白酶活性计算：
单位定义：每天每g土样中产生1μmol 酪氨酸为一个土壤中性蛋白酶活力单位。
土壤中性蛋白酶(U/g)=C标准×ΔA测定÷ΔA标准×V 反总÷W÷T= 0.1×ΔA测定÷ΔA标准÷W。
C 标准管：标准管浓度，0.2 μmol/mL；V 反总：酶促反应总体积，0.5mL；T：反应时间，1d；W：样本质量，g。
注意事项：
当吸光值大于1时，建议将上清液稀释后进行测定，计算时注意乘以稀释倍数。
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