欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:乙醇检测试剂盒

产品规格:60 assays (manual) / 600 assays (microplate) / 600 assays (auto-analyser)

产品货号:K-ETOH

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

以下文字为中文翻译,具体操作以英文版说明书为准,报价及货期联系我司客服。

*60个手动化验/试剂盒)或(每套件600个自动分析仪分析)或(每包600个微量板分析)

简介:

乙醇在自然发生中无处不在,因此,乙醇的定量测定不仅对生产醉酒、啤酒和烈性酒都很重要,而且对于低酒精和非酒*料、果汁和一系列其他食品,包括巧克力、糖果、果酱、蜂蜜、醋和乳制品都具有重要意义。大量非食品中也含有大量乙醇,如化妆品和药品。

原则:

乙醇的定量需要两种酶反应;在乙醇脱氢酶(ADH)催化的*反应中,乙醇被烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)(1)氧化为乙醛。+

ADH

1) 乙醇+NAD+乙醛+NADH+H+

然而,由于反应(1)的平衡有利于乙醇和NAD,因此需要进一步的反应来捕获产物。这是通过乙醛脱氢酶(Al-DH)和NAD2)存在下乙醛氧化为乙酸实现的。++

Al DH

2) 乙醛+NAD+HO+2乙酸+NADH+H+

该反应过程中形成的NADH的量是乙醇量的两倍的化学计量。它是通过340nm处吸光度的增加测量的NADH(图1,第12页)。

特异性、灵敏度、线性和精确度:

在分析过程中试剂的添加顺序消除了醛和酮的任何可能干扰。甲醇由于所用酶的K值不利而无法转化。对乙醇进行了优化,同时也实现了正丙醇和正丁醇的定量转化。较高的初级醇反应速度显著降低,在目前情况下,可能导致样品依赖的蠕变反应。m

该方法的最小鉴别吸光度为0.005吸光度单位。这对应于*样品体积为2.00 mL的样品溶液的0.023 mg/L。检测限为

0.093 mg/L,其来源于吸光度差为0.020,*样品体积为2.00 mL

该方法在每次测定0.2512μg乙醇范围内呈线性关系。在使用一个样品溶液进行重复测定时,可能发生0.0050.010的吸光度差。样品体积为2.00 mL时,这对应于样品溶液的乙醇浓度约为0.0230.046 mg/L。如果样品在样品制备过程中被稀释,则结果乘以稀释系数F。如果在样品制备过程中,称重样品,例如10 g/L,则可预期差值为0.020.05 g/100 g

干扰:

蒸馏水中存在的醇和用于分析的缓冲液或空气中,可导致空白增加或蠕变反应。因此,在测定过程中,必须覆盖试管。

如果乙醇的转化在试验规定的时间内完成(约5分钟),则一般可以得出结论,没有发生干扰。但是,在反应完成后,可向反应杯中加入乙醇(约5μg in 0.1ml)进一步检查。应观察到吸光度显著增加。

分析样品中的干扰物质可通过包括内部标准来识别。预计将对该标准进行定量恢复。通过进行回收试验,即在初始提取步骤中向样品中添加乙醇,确定样品处理和提取过程中的损失。

安全性:

应遵守适用于所有化学物质的一般安全措施。

有关本产品安全使用和处理的更多信息,请参阅Megazym上提供的相关SDS

套件:

适用于手动格式(或600份自动分析仪格式的分析或600份微型板格式分析)的试剂盒可从Megazyme获得。该试剂盒包含完整的分析方法和:

瓶子1

缓冲液(15 mLpH 9.0)加叠氮钠

0.02%w/v)作为防腐剂。

4°C下稳定2年以上。

2

不。+

-10°C以下稳定5年以上。

瓶子3

醛脱氢酶溶液(3.25 mL)。

-10°C以下稳定2年以上。

4

乙醇脱氢酶悬浮液(1.3 mL)。

4°C下稳定2年以上。

5瓶:

乙醇标准溶液(5 mL5 mg/mL)。

在密封良好的容器中(如提供)中稳定

>4°C2年。

试剂溶液/悬浮液的制备:

1. 使用所提供的瓶子1的内容。在4°C下稳定2年以上。

2. 将瓶2的含量溶于12.4 mL蒸馏水中。

4°C下稳定1年以上或在-10°C以下稳定2年以上(为避免重复的冻融循环,将其分成适当尺寸的小报价,并储存在聚丙烯管中)。

34使用所提供的瓶子34的内容物。在*打开之前,摇动瓶子,以去除可能已固定在橡胶塞上的任何酶。随后,将瓶子存放在直立位置。使用前,旋动瓶子混合内容物。

4°CADH)或低于-10°CAl DH)下稳定2年以上。

5.用蒸馏水稀释0.5ml瓶中550 mL的含量。存放在密封良好的杜兰瓶中。稀释后,该溶液在4°C下稳定2天。®

注:仅在对所用分光光度计的准确性或怀疑样品中物质引起抑制的地方,才对乙醇标准溶液进行分析。乙醇浓度直接由NADH的消光系数确定(第4页)。

设备(推荐):

1. 容量瓶(50毫升和100毫升)。

2. 一次性塑料试管(1厘米光程,3.0毫升)。

3. 微型吸管器,例如Gilson Pipetman20μL100μL)。®

4. 正位移管器,例如Eppendorf多个®

5.0 mL Combiti[分配0.2 mL缓冲液(瓶1)和NAD溶液]®+

加入25.0 mL Combiti(分配2.0 mL蒸馏水)。®

5. 分析平衡。

6. 分光光度计设置为340nm

7. 涡流混合器(例如IKA黄线试管振动台TTS2)。®

8.      Whatman 1号(9厘米)滤纸。

A、 手动分析程序:

波长:

340nm

反应杯:

1 cm光程(带盖的玻璃或塑料)

温度:

~20-25°C

最终卷:

2.57毫升

样品溶液:

每杯0.25-12μg乙醇

(以0.10-2.00 mL样品体积计)

逆风阅读(光路中没有反应杯)或防水

试管吸管

空白

样品

蒸馏水(~25°C

2.10毫升

2.00毫升

样品

-

0.10毫升

解决方案1(缓冲区)

0.20毫升

0.20毫升

解决方案2NAD+

0.20毫升

0.20毫升

溶液3(醛脱氢酶)

0.05毫升

0.05毫升

混合*并读取溶液(A)的吸光度约2分钟后,通过添加以下内容开始反应:1

悬浮液4(乙醇脱氢酶)

0.02毫升

0.02毫升

混合*并读取反应结束时溶液(A)的吸光度(约5分钟)。如果5分钟后反应未停止,则继续以1 min的间隔读取吸光度,直到吸光度持续增加超过1 min**2

*例如,使用微型平板振动器,在微型读卡器上摇动功能或重复抽吸(例如,使用50-100μL体积的吸管器)。

**如果样品的蠕变率大于空白,则将样品吸光度推回到悬浮液4的加入时间。

计算:

测定空白和样品的吸光度差(A-A)。从样品吸光度差中减去空白吸收差,从而获得δaδa的值应至少为0.100个吸光度单位,以获得足够精确的结果。21乙醇乙醇

乙醇浓度可计算如下:

c=V x MW xΔA[g/L]

εx d x v x 2

*:

V=最终体积[mL]

MW=乙醇分子量[g/mol]

ε=340nmNADH的消光系数

=6300[l x mol x cm]d=光路[cm]v=样品体积[mL]-1-1

2=每摩尔乙醇产生的2摩尔NADH

乙醇的使用情况如下:

c=2.57 x 46.07 xΔA[g/L]乙醇

6300 x 1.0 x 0.10 x 2

=0.09397 xΔA[g/L]乙醇

乙醇的(v/v)术语如下:

c=2.57 x 46.07 x 0.1266 xΔA[%v/v]乙醇

6300 x 1.0 x 0.10 x 2

=0.01190 xΔA[%v/v]乙醇

*:

0.1266=g/L转化为%v/v)的因子,取纯乙醇的密度为0.79g/mL

如果样品在制备过程中被稀释,则必须将结果乘以稀释系数F

分析样品制备称重的固体和半固态样品时,根据称重量计算含量(g/100g),如下所示:

乙醇含量

=西坦醇[g/L样品溶液]x 100[g/100 g]

重量[g/L样品溶液]样品

B、 自动分析仪分析程序:

笔记:

1. 乙醇自动分析仪测定程序可使用单点标准或全校准曲线执行。

2. 对于用于乙醇测定的每批样品,必须同时使用同一批试剂同时执行单点标准或校准曲线。

试剂制备如下:

R1的准备:

组成部分

体积

蒸馏水溶液1(缓冲)溶液2NAD)溶液3Al DH+

20.85毫升

2.4毫升

2.4 mL(在瓶中添加12.4 mL HO后)2

0.6毫升

总体积

26.25毫升

R2的制备:

组成部分

体积

蒸馏水悬浮液4ADH

3.2毫升

0.25毫升

总体积

3.45毫升

乙醇检测试剂盒K-ETOH示例方法:

R1

0.200毫升

示例:

~0.01毫升

R2

0.025毫升

反应时间:

37°C时约5分钟

波长:

340nm

制备试剂稳定性:

>冷藏2

计算:

终点

反应方向:

增加

线性度:

使用高达110 mg/L乙醇

0.01毫升样品体积

C、 微量板分析程序:

笔记:

1. 乙醇的微板分析程序可以使用单点标准或全校准曲线执行。

2. 对于用于乙醇测定的每批样品,必须同时使用同一批试剂同时执行单点标准或校准曲线。

波长:

340nm

微型板:

96井(例如,透明平底、玻璃或塑料)

温度:

~25°C

最终卷:

0.257毫升

线性度:

每井0.1-1.2μg乙醇

(以0.01-0.20 mL样品体积计)

井中移液管

空白

样品

标准

蒸馏水样品溶液标准溶液溶液1(缓冲)溶液2NAD)溶液3Al DH+

0.210毫升

-

-

0.020毫升0.020毫升

0.005毫升

0.200毫升

0.010毫升

-

0.020毫升0.020毫升

0.005毫升

0.200毫升

-

0.010 mL 0.020 mL 0.020 mL

0.005毫升

混合*并读取溶液(A)的吸光度约2分钟后,通过添加以下内容开始反应:1

悬架4ADH

0.002毫升

0.002毫升

0.002毫升

混合*并读取反应结束时溶液(A)的吸光度(约5分钟)。如果5分钟后反应未停止,则继续以1 min的间隔读取吸光度,直到吸光度持续增加超过1 min**2

 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我