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产品名称:土壤脲酶(S-UE)试剂盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-001,LE-2-001

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-001

土壤脲酶(S-UE)测试盒

可见分光光度法

50/24

380

LE-2-001

土壤脲酶(S-UE)测试盒

微量法

100管/48

750

土壤脲酶活性检测试剂盒说明书(可见分光光度法

产品内容:

试剂一:甲苯 10mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1 瓶,临用前加入 20mL 蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存; 

试剂三:液体 65mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四 A 液:液体 2mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四 B 液:液体 8mL×1 瓶,4℃保存;临用前将 A液倒入 B 液中混合,待用;未用完的液体 4℃保存一周。

试剂五:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

标准品:液体 1mL×1 支, 1mg/mL 氮标准液

产品说明:

S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

本法以尿素为基质,利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

操作步骤:

分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 630nm,蒸馏水调零
1、培养

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g

0.25

0.25

试剂一(μL

125

125

振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置 15min

试剂二(μL

625

 

蒸馏水(μL

 

625

试剂三(μL

1250

1250

混匀,放入 37℃水浴培养 24h 后,10000g 常温离心 10min,取上清液 

2、将培养结束的上清液稀释 10 倍(取 0.1mL 上清液,加入 0.9mL 蒸馏水)若吸光值仍大于 1.5 继续稀释。
3、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,稀释至 10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。
4、测氨量

测定管

对照管

标准管

稀释后的上清液或标准液

400

400

400

试剂四(μL

80

80

80

试剂五(μL

60

60

60

充分混匀,室温放置 20min

蒸馏水(μL

460

460

460

混匀,630nm 处蒸馏水调零,测 A 值,ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
标准曲线的建立:

根据标准管的浓度(y)和吸光度(x,减去浓度为 0 的空白管),做标准曲线。

脲酶活力的计算:

根据标准曲线,将ΔA(x)带入公式计算测定中样品的浓度(μg/mL)y 值。

单位的定义:每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。

脲酶活力(U/g 土样)=y×10×V 反总÷W÷T=80×y

10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V 反总:反应体系总体积:2mL;W:样本质量,0.25g。


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