产品名称:土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)试剂盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:LE-1-031,LE-2-031
免费咨询:0551-66107970
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
LE-1-031 |
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
900 |
LE-2-031 |
土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1700 |
测定意义
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解
的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
测定原理
S-β-XYS 催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在 405nm 处有特征吸收峰,测定 405nm 光吸收增加速率,可计算 S-β-XYS 活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
约 0.1g 鲜土或风干土样,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取 30min,然后 10000g, 4℃,离心 10min,取上清待测。
测定操作表:
1、分光光度计预热 30min,调节波长至 405nm。
2、操作表
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对照管 |
测定管 |
样本(μL) |
200 |
200 |
试剂一(μL) |
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50 |
试剂二(μL) |
400 |
350 |
混匀,45℃水浴 20min |
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试剂三(μL) |
400 |
400 |
混匀,静置 5min,405nm 处测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一 个对照管。 |
标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值ΔA。酶活定义:每克土样每天催化产生 1μmol 对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V 样总:加入提取液体积,1mL; V 反总:反应总体积,0.6mL;V 样:反应中样品体积,0.2mL; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
ΔA 控制在0.01-2 范围内,若ΔA 大于2,可适当减小样本量。标准曲线线性范围为:0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。
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