欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:多胺氧化酶(PAO)测试盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:LE-1-184,LE-2-184

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-184

多胺氧化酶(PAO)测试盒

分光光度法

50/48

900

LE-2-184

多胺氧化酶(PAO)测试盒

微量法

100管/96

1700

多胺氧化酶(PAO)试剂盒说明书(分光光度法

测定意义:

多胺氧化酶是催化生物体内多胺氧化的关键酶,通过调节体内多胺水平和生成物的浓度,参与各种植物体对逆境胁迫的反应和生长发育过程。

测定原理:

PAO 催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化氢酶存在的条件下与底物显色,在 550nm 下有特征吸收峰,通过测定吸光值增加速率来反映 PAO 活性。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存; 

试剂二:液体 6mL×1 瓶,4℃保存; 

试剂三:液体 3mL×1 瓶,4℃保存; 

试剂四:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。

粗酶液提取:

1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL) 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。

2、细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL) 500~1000:1 的比例(建 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。

3、血清等液体:直接测定。

测定步骤:

1 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 550nm,蒸馏水调零。

2 样本测定

试剂名称(µL

测定管

试剂一

700

试剂二

100

试剂三

50

样本

100

试剂四

50

迅速混匀,于 550nm 下测定初始吸光值 A1 30min 后吸光值 A2ΔA=A2-A1

PAO 活性计算:

1、按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A550 变化 0.002 为一个酶活力单位。

PAO(U/mg prot)=ΔA×V 反总÷(V 样×Cpr)÷0.002÷T =166.67×ΔA÷Cpr

2、按样本鲜重计算:

单位定义:每 g 组织在每 mL 反应体系中每分钟 A550 变化 0.002 为一个酶活力单位。

PAO(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.002÷T =166.67×ΔA÷W

3、按细菌或细胞密度计算:

单位定义:每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每分钟 A550 变化 0.002 为一个酶活力单位。

PAO(U/104 cell)=ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.002÷T =0.333×ΔA

4、按液体体积计算

单位的定义:每 mL 液体样本在每 mL 反应体系中每分钟 A550 变化 0.002 为一个酶活力单位。

PAO(U/mL)=ΔA×V 反总÷V 样÷0.002÷T =166.67×ΔA

V 反总:反应体系总体积,1×10-3 L;V 样:加入样本体积,0.1 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g 500:细菌或细胞总数,500 万。


 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我