水土中亚硝酸盐含量检测试剂盒说明书（可见分光光度法）

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

产品内容：

提取液：液体 100mL×1 瓶，室温保存。

试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃避光保存。

标准品：液体 1mL×1 支，1μmol/mL 亚硝酸钠标准溶液，4℃保存。

产品说明：

亚硝酸盐广泛存在于水体和土壤中，不仅是有机氮分解的重要中间产物，也可能来自污染。人体摄入过量后，可诱发消化系统癌变。

在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与 N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物，在 540nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。

操作步骤：

一、样品处理

1、土壤样品：准确称取过筛后的土壤约 1g，加入 2 mL 提取液，室温震荡 1h，8000rpm，25℃ 离心 15min，静置，待其分层后，取上清液待测。

2、水样：直接检测；如果浑浊，可以离心后再测定。

二、测定步骤和操作表

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。

2、将标准品用蒸馏水稀释成 0.04µmol/mL。

3、操作表

（1）土壤样品：NO₂（^-  μmoL/g）=(A 样本-A 空白）÷[(A 标准-A 空白)÷C 标准] ×V 样品÷（W×V样品÷V 提）=0.08×(A 样本-A 空白）÷ (A 标准-A 空白) ÷W

（2）水样：NO₂-（μmoL /mL）=(A 样本-A 空白）÷[(A 标准-A 空白)÷C 标准]

C 标准：标准溶液浓度，0.04μmol/mL；V 样品：反应样本体积，0.5mL；V 提：提取液体积，2mL；W：样本质量，g。

注意事项：

1、试剂盒 2-8℃保存。

2、本测定对于温度没有特别要求。

3、试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。

4、若检测出得 OD 值在标准曲线范围外，请将样品进行适当的浓缩或稀释（A540 <0.05 浓缩，A₅₄₀ > 1.6 适当稀释）