食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒说明书（分光光度法）

货号：LE-1-317

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

在食品中，亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更稳定，在食品加工业中作为保色剂，以维 持肉制品的良好外观，并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生，提高食用肉制品的安全，但是人体 长期摄入亚硝酸盐过量的食品，可诱发消化系统癌变。

测定原理

在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物，再与 N-1-萘基乙二胺形成 紫红色偶氮化合物，在 540nm 处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵或匀浆器、水浴锅、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。

试剂组成和配制

提取液一：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。

提取液二：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。

提取液三：液体 50 mL×1 瓶，室温保存。

提取液四：粉剂 100 mg ×1 支，室温保存。

试剂一：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃避光保存。

样品处理

称取样品约 0.2g 鲜重或 0.05g 干重，破碎，加入 0.5 mL  提取液一，沸水浴 15min，冷却至 室温，加入 0.5 mL 提取液二，震荡摇匀，加 0.5 mL  提取液三，用镊子加少量粉剂四（约 1 mg），静置 30min ，25℃, 8000g 离心 15 min ，取上清液待测。

测定步骤和操作表

注意：空白管只需测定一次。

亚硝酸盐含量计算

标准曲线回归方程为：y=0.234x + 0.0002，R²= 0. 999  x 为标准品亚硝酸钠浓度(μg/ml） y 为吸光值 A。

NO2- (μg/g）= (△A-0.0002）÷0.234×V 样÷（V 样÷V 样总×W）×0.6668 

= (△A-0.0002）÷0.234×1.5×0.6668÷W

=4.27× (△A-0.0002）÷W

V 样总：加入提取液体积，1.5 mL； V 样：反应中样品体积，0.35mL；W：样品质量，g。

注意事项

1、试剂盒 2-8℃保存。

2、试剂对人体有一定的危害，请穿实验服，戴手套操作。

3、△A > 1.5  可以适当稀释样本。

4、最低检出限为 0.5 μg/g。