欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:柠檬酸合酶(CS)试剂盒

产品规格:10管/9样,25管/24样,50管/48样,100管/96样

产品货号:LE-1-216,LE-2-216,LE-3-216,LE-4-216

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-216

柠檬酸合酶(CS)测试盒

可见分光光度法

10/9

1200

LE-2-216

柠檬酸合酶(CS)测试盒

可见分光光度法

25/24

2000

LE-3-216

柠檬酸合酶(CS)测试盒

可见分光光度法

50/48

3200

LE-4-216

柠檬酸合酶(CS)测试盒

微量法

100/96

6000

柠檬酸合酶(citrate synthaseCS)试剂盒说明书(可见分光光度法-50/48

产品内容:

试剂一:液体50mL×1 瓶,-20℃保存;

试剂二:液体10mL×1 瓶,-20℃保存;

试剂三:液体1mL×1 支,-20℃保存;

试剂四:液体50mL×1 瓶,4℃保存;

试剂五:粉剂×2 支,4℃保存,临用前加入800μL 无水乙醇,用不完的试剂4℃保存一周;

试剂六:粉剂×支,-20℃保存,临用前加入1600μL 蒸馏水,用不完的试剂仍-20℃保存;

试剂七:粉剂×2 支,-20℃保存,临用前加入800μL 蒸馏水,用不完的试剂仍-20℃保存;

产品说明:

CSEC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。CS 催化乙酰CoA 和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶A,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色的DTNB 转变成黄色的TNB,在 412nm 处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水

操作步骤:

一、 样本的前处理:

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:

(1) 称取约0.1g 组织或收集500万细胞,加入1mL 试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

(2) 将匀浆600g4℃离心5min

(3) 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g4℃离心10min

(4) 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的CS(此步可选做)。

(5) 在步骤(4)中的沉淀中加入200uL 试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3 秒,间隔10 秒,重复30 次),用于线粒体CS 测定。

二、 测定步骤:

1、 分光光度计预热30min 以上,调节波长至412nm,蒸馏水调零。

2、 将试剂四、五、六和七在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min

3、 样本测定

试剂名称(μL

测定管

试剂四

780

试剂五

30

试剂六

30

样本

30

试剂七

30

将上述试剂按顺序加入1 mL 玻璃比色皿中,加试剂七的同时开始计时,在412nm 波长下记录20 秒时的初始吸光度A1 和反应2min 后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1

三、 CS 活性计算:

1、按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg 组织蛋白每分钟催化产生1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。

CSnmol/min /mg prot)=[ΔA×V 反总÷ε×d×109]÷(V ×Cpr) ÷T=1100×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

2、按样本鲜重计算

单位的定义:每g 组织每分钟催化产生1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。

CSnmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷ε×d×109W× V ÷V 样总)÷T=222.2×ΔA÷W

3、按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1 万个细菌或细胞每分钟催化产生1 nmol TNB 定义为一个酶活力单位。

CSnmol/min /104 cell=[ΔA×V 反总÷ε×d×109500×V ÷V 样总)÷T=0.4444×ΔA

V 反总:反应体系总体积,9×10-4 LεTNB 摩尔消光系数,1.36×104 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV 样:加入样本体积,0.03 mLV 样总:加入提取液体积,0.202 mLT:反应时间,2 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g500:细胞或细菌总数,500 万。

 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我