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产品名称:生物碱含量试剂盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:LE-1-375,LE-2-375

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-375

生物碱含量测试盒

分光光度法

50/48

420

LE-2-375

生物碱含量测试盒

微量法

100/96

800

生物碱含量试剂盒说明书(分光光度法

货号:LE-1-375

式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

生物碱存在于自然界(主要为植物,但有的也存在于动物)中的一类含氮的碱性有机化合物 大多数有复杂的环状结构,氮素多包含在环内,有显著的生物活性,是中草药中重要的有效成分之一。

测定原理:

生物碱与溴甲酚绿指示剂反应,生成绿色化合物,在 416nm 处有最大吸收峰。

需自备的仪器和用品:

分光光度计、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:液体 10mL× 1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 50mL × 1 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 20mL × 1 瓶,4℃避光保存;

生物碱的提取:

样本烘干粉碎,过 80 目筛。称取约 0.1g 样本,加入 0.1mL 试剂一,再加入 0.9,mL80%乙醇, 充分混匀后转移到EP 管中,超声波提取 60min 8000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。另取空 EP 管,加入 0.1mL 试剂一和 0.9,mL80%乙醇,混匀后作为空白液。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 416nm 处。

2、操作表:在EP 管中加入如下试剂

试剂名称(µL )

空白管

测定管

样本

 

150

空白液

150

 

试剂二

750

750

试剂三

300

300

混匀,室温静置 5min

氯仿

1500

1500

剧烈振荡混匀,室温静置 40min,吸取下层氯仿层 1mL 1mL 玻璃比色皿,416nm 处读取吸光值 A,ΔA=A 测定-A 空白,空白管只要做一管。

生物碱含量计算:

标准条件下测定的回归方程为 y = 3.83x - 0.0005,R2 = 0.9942;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为 ΔA。

生物碱含量(mg/g 干重)=(ΔA+0.0005)÷3.83×V 样总÷W

= 0.261×(ΔA+0.0005) ÷W

V 样总:加入提取液体积,1mL;W:样本鲜重,g。


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