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产品名称:土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)试剂盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:LE-1-012,LE-2-012

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-012

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒

可见分光光度法

50管/48样

240

LE-2-012

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)测试盒

微量法

100管/96样

450

土壤碱性磷酸酶(S-AKP/ALP)活性测定试剂盒说明书(可见分光光度法

测定意义:

土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷化合物矿化的酶,其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性,是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影响。通常按照其最适 pH 范围,分为碱性、中性和酸性三种类型磷酸酶。

碱性环境中,S-AKP/ALP 催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,通过测定酚的生成量即可计算出 S-AKP/ALP 活性。

产品内容:

试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。用前加 50mL 蒸馏水充分溶解。试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加 1152µL 无水乙醇(自备),48 µL 蒸馏水充分溶解。(变褐色后不能再使用)

标准品:液体 1mL×1 支,0.5µmol/mL 苯酚标准液,4℃保存。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯(不允许快递)。

操作步骤:

催化反应:

称取风干混匀土壤约 0.1g,加入 0.05mL 甲苯(自备),轻摇 15min;加 0.4 mL 试剂一并且摇匀后,置于 37℃恒温培养箱,开始计时,催化反应 24h;到时后迅速加入 1mL 试剂二充分混匀,以终止酶催化的反应。10000rpm 室温离心 10min,取上清液置于冰上待测。

显色反应:

1分光光度计预热 30 min 以上,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。

2. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 µL 试剂一,100 µL 试剂三,20 µL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 µL,混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 空白管。

3. 标准管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 µL 标准液,100 µL 试剂三,20 µL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 µL,混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 标准管。

4. 测定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 µL 上清液,100 µL 试剂三,20 µL 试剂四,充分混匀,显色后再加蒸馏水 830 µL,混匀后室温静置 30 min,于 660 nm 测定吸光度,记为 A 测定管。

S-ALP 活性计算:

活性单位定义:37℃中每克土壤每天释放 1µmol 酚。

S-AKP/ALP(U/g 土样)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W÷T×1000

= 725×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W

C 标准液:0.5µmol/L;V 总:催化体系总体积,1.45mL;W:土壤样品质量,g;T:催化反应时间,24 h=1 d。


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