欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:过氧化氢(H2O2)测试盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:LE-1-164,LE-2-164

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-164

过氧化氢(H2O2)测试盒

可见分光光度法

50管/48样

180

LE-2-164

过氧化氢(H2O2)测试盒

微量法

100管/96样

350

过氧化氢(H2O2)测试盒说明书可见分光光度法

产品内容

试剂一:丙酮 100mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 6mL 浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂 4℃保存; 

试剂三:液体 12mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存。约1mmol/mL 标准液

产品说明:

H2O2 是生物体内最常见的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化产生,由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体; 另一方面 H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。H2O2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在 415nm 有特征吸收。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、丙酮、浓盐酸、研钵和冰。

操作步骤:

一、H2O2 提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备

收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、组织样品的制备

称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取全部上清液(注意吸取干净),置冰上待测。

3、血清(浆)样品

按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀。

注意事项:

1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。

2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。

二、测定步骤和加样表

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 415nm,蒸馏水调零。

2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。

3、配制1μmol/mL过氧化氢溶液。本试剂盒提供的过氧化氢浓度约为1M。由于过氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1mmol/mL的过氧化氢用丙酮稀释100倍,使过氧化氢的浓度约为10μmol/mL。用分光光度计(石英比色皿)测定A240。过氧化氢浓度(μmol/mL)=22.94× A240从而计算出本试剂盒提供的过氧化氢的实际浓度。然后再根据实际的过氧化氢浓度配制1μmol/mL过氧化氢溶液。

4、在 EP 管中按顺序加入下列试剂

试剂名称

测定管

标准管

对照管

样本

吸取的量为全部上清液

 

 

1umol/mL 标准溶液

 

1000

 

试剂一

 

 

1000

试剂二

100

100

100

试剂三

200

200

200

4000g,常温离心 10min,弃上清,留沉淀

试剂四

1000

1000

1000

加入试剂四溶解沉淀(可用丙酮清洗 3-5 次先洗去植物色素),室温静置 5min,倒入比色皿中, 415nm 处,蒸馏水调零,记录测定管吸光度。对照管只需做一次即可。计算∆A 测定=A 测定管-A 对照管,∆A 标准=A 标准管-A 对照管

三、H2O2 含量计算:

1、按照细菌、细胞个数计算:

细菌或细胞中 H2O2 含量(μmol/104 细菌或细胞)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(500×V 样本÷V 提取)=0.002×∆A 测定÷∆A 标准。

2、按组织鲜重计算:

组织中 H2O2 含量(μmol/g 鲜重)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(V 样本÷V 提取×W)=∆A 测定÷∆A 标准÷W。

3、按照蛋白浓度计算:

H2O2 含量(μmol/mg prot)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(Cpr×V 样本)=∆A 测定÷∆A 标准÷Cpr。

4、按血清(浆)体积计算:

血清(浆)中 H2O2 含量(μmol/mL)= ∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷V 血清(浆)=10×∆A 测定÷∆A 标准。

500:细胞个数,以万计;C 标液:H2O2 标准溶液浓度,1μmol/mL;V 样本:加入的样本体积,1mL;W:组织鲜重,g;V 提取:提取过程中所用体积,1mL;Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL;V 血清(浆):所用血清(浆)体积,0.1mL。


 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我