土壤全硼试剂盒说明书（可见分光光度法）

测定意义：

硼是植物生长发育必需的七种微量营养元素之一 ，土壤中硼素的含量高低直接影响着植物的生长状 况。

测定原理：

硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物，在 420nm 有特征吸收峰。

试剂组成和配制：

提取剂：粉剂×1 瓶，4℃保存。

提取液：液体 100mL×2 瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1 瓶 ，4℃保存 。 临用前加 20ml 水溶解，加 0.625ml 乙酸。

试剂二：粉剂×1瓶 ，4℃避光保存 。临用前加 10ml 蒸馏水溶解。

自备仪器和用品：

天平 、 常温离心机 、可见分光光度计 、马弗炉 、 1 ml 玻璃比色皿。

样本处理：

新鲜土样风干，过 100 目筛，按照土壤质量（g） ：提取剂质量(g)为 1 ：4 的比例（建议称取约 0. 1g 土样，加入 0.4g 提取剂）缓慢加入提取剂于坩埚中，边加边搅拌均匀，然后在马弗炉中 550℃熔融 10min， 然后在 920℃熔融 30min，趁热取出坩埚，将熔融物转入烧杯，边搅拌边加 4ml 提取液，必要时加盖，防止溶液溅出，溶解 30min 后，5000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。

测定操作表：

计算公式：

标准曲线：y = 0.3897x - 0.2359，R² = 0.9995

全硼含量（mg/kg 干重）=  (△A+0.2359）÷ 0.3897×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）

= 51.32×(△A+0.2359） ÷W

V 反总：反应总体积，1ml；V 样：反应体系中加入样本体积，0.2ml；V 样总：加入提取液体积，4ml， W：样本质量，g

注意事项：

1、配制好的试剂二 4℃保存不可超过 7 天。

2、显色时严格控制温度并且避光， 以免显色剂见光分解。