产品名称:土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:YX-C-B937,YX-W-B937
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-B937 |
土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒 |
紫外分光光度法 |
50管/24样 |
420 |
YX-W-B937 |
土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
800 |
土壤过氧化氢酶(Solid-Catalase,S-CAT)试剂盒说明书(微量法)
注意:正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
产品内容:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存;临用前加入29.7mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃ 保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入1mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:液体×1 瓶,4℃保存。
产品说明:
S-CAT 是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2 清除系统中具有重要作用。
H2O2 在240nm 下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT 活性的高低。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV 板)和蒸馏水
操作步骤:
一、 样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
二、 测定步骤:
1、 分光光度计或酶标仪预热30min 以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零。
2、 加样表
试剂名称 |
测定管 |
无基质管 |
无土管 |
风干土样(g) |
0.03 |
0.03 |
|
试剂一(μL) |
260 |
|
260 |
双蒸水(μL) |
|
260 |
|
25℃振荡培养 20min |
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试剂二(μL) |
10 |
10 |
10 |
混匀 8000g,25℃离心 5min,取全部上清 |
|||
试剂三(μL) |
30 |
30 |
30 |
三、 S-CAT 活性计算:
A、用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:每天每g 风干土样催化1μmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(μmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)
×106]÷W÷T=16.5×(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样本质量,0.03g。
B、用96 孔板测定的计算公式如下
单位的定义:每天每g 风干土样催化1μmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(μmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)
×106]÷W÷T=33×(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L / mol /cm;d:96
孔板光径,0.5cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样品质量,0.03g
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