土壤过氧化物酶（S-POD）活性检测试剂盒说明书（可见分光光度法）

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

产品内容：

试剂一：粉剂×2 瓶，临用前每瓶加入10mL 蒸馏水，用不完的试剂仍4℃保存； 试剂二：液体5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂三：液体10mL×1 瓶，4℃保存；

试剂四：乙醚 100mL×1 瓶，4℃保存；（自备）

标准品：液体 10mL×1 瓶，4℃保存，相当于每 mL 乙醚相中含有 0.1mg/mL 紫色没食子素。

产品说明：

S-POD 主要来源于土壤微生物，能够氧化土壤有机物质产生过氧化物，在腐殖质的形成过程中具有重要作用。S-POD 催化有机物质氧化成醌，后者在430nm  有特征光吸收。

自备用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、乙醚（不允许快递）、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：

1、样品处理：

新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

2、标准品处理：将标准品用0.5 mol/L HCl溶液稀释至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL。分光光度计预热30min以上，调节波长至430nm，0mg/mL管调零，测定标准管的吸光度，根据吸光度和浓度建立标准曲线。

3、测定步骤：

4、S-POD 活力计算：

根据标准曲线，将△A（x）带入公式中计算出y值（mg/mL）。

单位的定义：每天每g 土样中产生1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-POD 活力（U /g  土样）＝y×V提取相÷W÷T=840×y

T：反应时间，1h=1/24d；V 提取相：提取相总体积 1.75mL；W：样本质量，0.05g。

注意事项：每个样品均需做无基质管。