欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:胃蛋白酶检测试剂盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-356,LE-2-356

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-356

胃蛋白酶测试盒

可见分光光度法

50/24

240

LE-2-356

胃蛋白酶测试盒

微量法

100/48

450

胃蛋白酶活性检测试剂盒说明书(微量法

品内容:

提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 10 mL 试剂二充分溶解。

试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 10mL 蒸馏水充分溶解。

产品说明:

胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌,分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别, 慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。

胃蛋白酶可催化血红蛋白水解,水解产物酪氨酸在 275nm 下有特征吸收峰。通过测定吸光值的变化来计算酶活。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 UV 板、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、粗酶液提取:

称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液或者 0.1mL 胃液加入 0.9mL 提取液,进行冰浴匀浆。10000 rpm 4℃离心 10 分钟,取上清,即粗酶液,置冰上待测。

二、测定步骤:

1、紫外分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长到 275 nm,蒸馏水调零。

2、按下表操作:

 

测定管

对照管

样本(μL)

20

-

试剂一(μL)

100

100

混匀,37℃保温 10min。

试剂三(μL)

100

100

摇匀 1min。

样本(μL)

-

20

混匀后 10000rpm 4℃ 离心 10min,取上清用微量石英比色皿/96  UV 板测定 A275nm。计∆A=A 测定-A 对照

注意:对照管后加粗酶液,而测定管先加粗酶液

三、胃蛋白酶活性计算:

1、用石英比色皿

(1)按样本蛋白浓度计算:

活性单位(U)定义:37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。

胃蛋白酶(U/mg prot)=(∆A÷Ɛ÷d×V 反总)÷(Cpr×V 样本)÷T

= 0.786×∆A÷Cpr

(2)按样本鲜重计算:

活性单位(U)定义:37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。

胃蛋白酶(U/g 鲜重)=(∆A÷Ɛ÷d×V 反总)÷(W×V 样本÷V 提)÷T

=0.786×∆A÷W。

(3)按液体体积计算:

活性单位(U)定义:37℃下每毫升液体每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。

胃蛋白酶(U/mL)=(∆A÷Ɛ÷d×V 反总)÷(V 样本÷V 提×V 液)÷T

= 0.786×∆A

Cpr:粗酶液蛋白质浓度(mg/mL),需要另外测定;V 反总:反应总体积,0.22mL;V 提:粗酶液总体积,1mL;T:催化反应时间,10min;V 样本:加入样本体积,0.02mL;V 液:液体体积, 0.1mL;Ɛ:酪氨酸吸光系数,1.4μmol-1·mL·cm-1d:光程,1cm

2、用 96 孔 UV 板

(1)按样本蛋白浓度计算:

活性单位(U)定义:37℃下每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。

胃蛋白酶(U/mg prot)=(∆A÷Ɛ÷d×V 反总)÷(Cpr×V 样本)÷T

= 1.31×∆A÷Cpr

(2)按样本鲜重计算:

活性单位(U)定义:37℃下每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。

胃蛋白酶(U/g 鲜重)=(∆A÷Ɛ÷d×V 反总)÷(W×V 样本÷V 提)÷T

=1.31×∆A÷W

(3)按液体体积计算:

活性单位(U)定义:37℃下每毫升液体每分钟催化血红蛋白水解生成 1μmol 酪氨酸为一个酶活单位。

胃蛋白酶(U/mL)=(∆A÷Ɛ÷d×V 反总)÷(V 样本÷V 提×V 液)÷T

= 1.31×∆A

Cpr:粗酶液蛋白质浓度mg/mL),需要另外测定;V 反总:反应总体积,0.22mL;V 提:V提:粗酶液总体积,1mL;T:催化反应时间,10min;V 样本:加入样本体积,0.02mL;V 液:液体体积,0.1mL;Ɛ:酪氨酸吸光系数,1.4μmol-1·mL·cm-1d:光程,0.6cm。


 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我