货号：LE-1-163

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

羟自由基作用于体内蛋白质 、核酸、脂类等生物分子，造成细胞结构和功能受损，进而导致体内代谢 紊乱引起疾病 。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一，在抗氧化类保健品和药品研究中得 到广泛应用。

测定原理：

H2O2/ Fe2+  通过 Fenton 反应产生羟自由基，将邻二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe2+氧化为 Fe3+    ，导致 536nm 吸光度下降，样品对 536nm 吸光度下降速率的抑制程度，反映了样品清除羟自由基的能力。

试剂盒的组成：

提取液：液体 50ml × 1瓶，4℃保存

试剂一：液体 16ml× 1瓶，4℃避光保存

试剂二：液体 8ml× 1瓶，4℃避光保存

试剂三：液体 16ml× 1瓶，4℃保存

试剂四：液体 9ml× 1瓶，4℃保存

自备仪器和用品：

恒温水浴锅 、可见分光光度计 、 1 ml 玻璃比色皿和蒸馏水。

样品的制备：

1、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(ml)为 1 ：5~ 10 的比例（建议称取约 0. 1g 组织，加入 1ml 提取 液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2、血清 、果汁等液体样品可直接测定。

3、提取物（或者药物）可配制成一定浓度，如 5 mg/ml。

测定操作表

1 、分光光度计预热 30min，调节波长至 536nm，蒸馏水调零。

2、工作液配制：使用之前按照每管试剂一 ：试剂二：试剂三=300:150:300  ( µl）的比例配制，用多少配多 少 ，混匀。

3、在 EP 管中加入如下试剂

注意 ：空白管和对照管只需测定一次。

计算公式

羟自由基清除率 D% =（A 测-A 对）÷（A 空-A 对）×100% 

A 空 、A 对 、A 测：空白管 、对照管和测定管的吸光值。

注意事项

为了比较不同样品羟自由基清除能力，对于同一批样品必须加入等量的样品，血清 、组织匀浆 、果汁等液 体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓度。