果糖-1,6-二磷酸（FDP）试剂盒说明书(分光光度法) 

货号：LE-1-237

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

果糖 1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂，是糖酵解途径的重要中间体，广泛存在于动植物和微生物体内，能影响细胞内钾离子的浓度，改善葡萄糖和其他能量底物的代谢， 促进组织氧的释放，广泛应用于临床医药制剂。

测定原理

醛缩酶催化果糖 1,6-二磷酸降解，产物与 DNPH 缩合成紫红色物质，在 540nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。

试剂组成和配制

试剂一：液体 65mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 1mL×1 支，4℃避光保存。

试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂四：液体 40mL×1 瓶，4℃保存。

样品处理

1、组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。

2、细胞：按照细胞数量（10⁴ 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1  的比例（建议 500万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。

3、液体：直接检测。

测定操作

计算公式

标准曲线：y= 0.6971x+0.0012，R²=0.9983

1、按照质量计算

FDP（mg/g 鲜重）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（W÷V 样总）

= 1.43×(△A-0.0012)÷W

2、按照细胞数量计算

FDP（mg/10⁴ cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（细胞数量÷V 样总）

= 1.43×(△A-0.0012)÷细胞数量

3、按照液体体积计算

FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971

= 1.43×(△A-0.0012)

W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1mL

注意事项：最低检出限为 1.72 mg/L。