产品名称:土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)试剂盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:LE-1-032,LE-2-032
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
LE-1-032 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
750 |
LE-2-032 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1400 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性试剂盒说明书(可见分光光度法)
产品内容:
试剂一:液体 65mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;
产品说明:
S-LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
S-LAP测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。
2、在试剂二瓶中加入 30mL 试剂一充分溶解(如较难溶解,可 60℃水浴加热约 30min 促进溶解);在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、操作表
试剂名称 |
对照管 |
测定管 |
新鲜土样(g) |
0.2 |
0.2 |
试剂一(μL) |
1200 |
|
试剂二(μL) |
|
1200 |
混匀, 37℃振荡反应 1h 后,8000g 4℃离心 10min,取 1mL 上清液于比色皿中,405nm 处测定吸光值 A,计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
S-LAP 活力单位的计算:
单位的定义:每天每 g 土样每天生成 1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP(μmol/d /g 土样)=ΔA×V 反总÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V 反总:反应体系总体积,1.2×10-3 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cm; d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d; W:样本质量,0.2g。
注意事项:
当∆A 大于 1 时,建议将上清液稀释后进行测定;当∆A 小于 0.01 时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。
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