产品名称:土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)试剂盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:LE-1-033,LE-2-033
免费咨询:0551-66107970
货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
LE-1-033 |
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
650 |
LE-2-033 |
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1200 |
土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒说明书(可见分光光度法)
产品内容:
试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入3mL 丙酮溶解,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体60mL×1瓶,4℃保存;
标准品:液体1mL×1支,5 mmol/L的对硝基苯酚溶液,4℃保存。临用前用试剂一将标准品稀释50倍得100µmol/L 的标准溶液。
产品说明:
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-NAG分解对硝基苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛(或更小)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理:
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。
二、测定步骤:
1、分光光度计预热30min,波长调至400nm,蒸馏水调零。
2、加样表:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
风干土样(g) |
0.1 |
0.1 |
- |
- |
试剂一(µL) |
550 |
550 |
- |
- |
试剂二(µL) |
50 |
- |
- |
- |
混匀, 37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min(盖紧, 防止水分散失),流水/冰浴冷却。 |
- |
- |
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试剂二(µL) |
- |
50 |
- |
- |
12000g 25℃离心10min,取上清液 |
- |
- |
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上清液(µL) |
500 |
500 |
- |
- |
标准品(µL) |
- |
- |
500 |
- |
蒸馏水(µL) |
- |
- |
|
500 |
试剂三(µL) |
1000 |
1000 |
1000 |
1000 |
室温静置2min 后,10000g 常温离心5min,取上清测定400nm处的吸光值A。分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管。计算∆A=A 测定管-A 对照管,∆A标准=A标准管-A空白管。每个测定管设一个对照管。 |
三、S-NAG 活力计算:
单位的定义:每天每g土样中产生1 µmol 对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG活力(U/g 土样)=∆A÷ (∆A标准÷C标准)×V 反总÷W÷T =1.44× ∆A÷ ∆A标准÷W。
T:反应时间,1h=1/24d;V 反总:反应体系总体积:6×10-4 L;C标准:标准溶液浓度,100µmol/L; W:样本质量,g。
注意事项:
当∆A 大于 1 时,建议将上清液稀释后进行测定;当∆A 小于 0.02 时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。
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