欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:过氧化氢酶(CAT)测试盒

产品规格:50管/48样,100管/96样

产品货号:LE-1-159,LE-2-159

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-159

过氧化氢酶(CAT)测试盒

紫外分光光度法

50/48

100

LE-2-159

过氧化氢酶(CAT)测试盒

微量法

100/96

190

过氧化氢酶(CAT)活性检测试剂盒说明书(紫外分光光度法

产品内容:

提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 100μL×3 瓶,4℃保存。

产品说明:

CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的 H2O2 清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。

H2O2  240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H2O2,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。

试验中所需的仪器和试剂:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

操作步骤:

一、粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备

细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量104 ):提取液体积(ml) 500-1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液),超声波破碎细菌或细胞(功率 20% 200w,超声 3 秒,间隔 10 秒。重复 30 次);8000g 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

二、CAT 测定操作

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 240nm 处,蒸馏水调零。

2、 CAT 检测工作液的配置:用时在每瓶试剂二(100μL)中加入 20ml 试剂一,充分混匀,作为工作液;用不完的试剂 4℃保存一周。

3、 测定前将 CAT 检测工作液 37℃(哺乳动物)或 25℃(其他物种)水浴 10min。

4 1mL CAT 检测工作液于 1mL 石英比色皿中,再加入 35μL 样本,混匀 5s;室温下立即测定 240nm下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。计算ΔA=A1-A2

三、CAT 活性计算:

1、 血清(浆)CAT 活力的计算:

单位的定义:每毫升血清(浆)在反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。

CAT(U/mL)=﹝ΔA×V 反总÷(ε×d)×109÷V 样÷T=678×ΔA

2、 组织、细菌或细胞中 CAT 活力计算:

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。

CAT(U/ mg prot)=﹝ΔA×V 反总÷(ε×d)×109÷(V 样×Cpr)÷T=678×ΔA÷Cpr

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。

CAT(U/g 鲜重)=﹝ΔA×V 反总÷(ε×d)×109÷(W×V 样÷V 样总)÷T=678×ΔA÷W

3、 按细菌或细胞中 CAT 活力计算:

单位的定义:每 1 万个细菌或细胞在每分钟反应体系中每分钟催化 1nmol H2O2 降解定义为一个酶活力单位。

CAT(U/104 cell)=﹝ΔA×V 反总÷(ε×d)×109÷(500×V 样÷V 样总)÷T=1.356×ΔA

V 反总:反应体系总体积,1.035×10-3L;ε: H2O2 摩尔吸光系数,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 样:加入样本体积,0.035ml;V 样总:加入提取液体积,1ml;T:反应时间,1min。W,样本质量,g;Cpr:上清液蛋白浓度,mg/ml;500:细胞或细菌总数,500 万。


 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我