欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:酪氨酸解氨酶(TAL)测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-180,LE-2-180

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-180

酪氨酸解氨酶(TAL)测试盒

分光光度法

50/24

520

LE-2-180

酪氨酸解氨酶(TAL)测试盒

微量法

100管/48

1000

酪氨酸解氨酶试剂盒说明书(分光光度法)

货号:LE-1-180

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

TAL 广泛存在于植物和微生物中,是苯丙氨酸代谢途径的关键酶之一。TAL 能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将酪氨酸转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。

测定原理:

TAL 能够分解酪氨酸产生香豆酸,使反应溶液 333nm 下的吸光度随反应时间而上升,根据吸光度的变化率可计算出TAL 活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配制:

提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:粉剂×2 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

粗酶液提取:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次) 8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)果汁等液体样品:直接检测。

测定步骤:

1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 333nm,蒸馏水调零。

2、试剂二的配置:临用前在试剂二瓶中加入 15mL 试剂一充分溶解待用(用不完的试剂 4℃ 保存一周,注意现配现用),在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。

3、在EP 管中依次加入如下试剂

试剂名称(μL)

测定管

对照管

样本上清

100

100

试剂一

 

900

试剂二

900

 

充分混匀,40℃保温 60min

试剂三

50

50

混匀,10000g4℃离心 5min,取 0.8~1mL 上清至 1mL 石英比色皿,333nm 下测定吸光值 A测定与A 对照,ΔA=A 测定-A 对照

TAL 活性计算:

1、血清(浆)或果汁 TAL 活性

单位的定义:每分钟每 mL 血清(浆)或果汁在每 mL 反应体系中使 333nm 处吸光值变化0.01 为一个酶活力单位。

TAL(U/mL)=ΔA×V 反总÷( V 样÷V 样总)÷0.01÷T

=17.5×ΔA

2、组织、细菌或细胞 TAL 活性

1按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每分钟每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中使 333nm 处吸光值变化 0.01 为一个酶活力单位。

TAL(U/mg prot)=ΔA×V 反总÷(V 样×Cpr )÷0.01÷T

=17.5×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

2按样本鲜重计算:

单位定义:每分钟每 g 组织在每 mL 反应体系中使 333nm 处吸光值变化 0.01 为一个酶活力单位。

TAL(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T

=17.5×ΔA÷W

3按细菌或细胞密度计算:

单位定义:每分钟每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中使 333nm 处吸光值变化 0.01 为一个酶活力单位。

TAL(U/104 cell)=ΔA×V 反总÷( 500×V 样÷V  样总)÷0.01÷T

=0.035×ΔA

V 反总:反应体系总体积,1.05mL;V 样:加入样本体积,0.1mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,60 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500: 细胞或细菌总数,500 万。


 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我