产品名称:二胺氧化酶(DAO)活性测试盒
产品规格:50管/24样,100管/48样
产品货号:YX-C-A406,YX-W-A406
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-A406 |
二胺氧化酶测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
950 |
YX-W-A406 |
二胺氧化酶测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
1800 |
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。
测定原理:
DAO 催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在 460nm 处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率, 计算 DAO 活性。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 0.25mL×1 支,4℃保存。
试剂二:液体 2mL×1 管,4℃保存。
试剂三:液体 1mL×1 管,4℃保存。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 20min,取上清,置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后 10000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 460nm,蒸馏水调零。
2、操作表
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对照管 |
测定管 |
粗酶液(μ L) |
50 |
50 |
提取液(μ L) |
128 |
108 |
试剂一(μ L) |
2 |
2 |
试剂二(μ L) |
20 |
20 |
试剂三(μ L) |
|
20 |
混匀,37℃水浴 30min,微量石英比色皿/96 孔板,蒸馏水调零,测定 460nm 吸 光值。Δ A=A 测定-A 对照。 |
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