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产品名称:脱氢酶(DHA)试剂盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-379,LE-2-379

产品报价:

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货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-379

脱氢酶(DHA)测试盒

可见分光光度法

50管/24样

600

LE-2-379

脱氢酶(DHA)测试盒

微量法

100管/48样

1150

脱氢酶(DHA) 试剂盒说明书(可见分光光度法)

测定意义

物体的脱氢酶(Plant dehydrogenase , DHA)的活性在很大程度上反映了生物体的活性 状态,能直接表示生物细胞对其基质降解能力的强弱。

测定原理

受氢体 2,3,5-氯化三苯基四氮唑 (2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,即 TTC) 在细胞呼吸过程中接受氢以后,其还原产物三苯基甲鐟 (TriphenylFormazone,即 TF) 呈现 红色,在波长 485nm 处有最大吸收峰,测定其 485nm 吸光值,即得植物脱氢酶活性

自备实验仪器及用品

恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、研钵、滤纸、可见分光光度计、1mL 比色皿、冰、蒸 馏水和乙酸乙酯 (不允许快递,请用户自备)。

剂的组成和配制

试剂一:粉剂×2 瓶,使用前加少量水溶解,定容至 60mL,避光、4℃保存 (尽量现配现用)

试剂二:液体 60mL×6,4℃保存。

试剂三:乙酸乙酯, 自备。

样品处

0.5-1g 的植物组织,用双蒸水清洗 3-4 次,用滤纸吸干水分,备用。

测定步骤和操作表

 

对照管

定管

(g)

0.5-1

0.5-1

剂一 (mL)

 

5

剂二 (mL)

10

5

充分混匀,37 ,暗培养 3h,取出后立即冰浴 5min,过滤,去滤液,尽量用滤纸吸干样品,置于研钵中。

剂三 (mL)

5

5

充分研磨,吸取红色液体于离心管中,用少量试剂三冲洗研钵,一起加入离心管,用试剂三 定容至 15mL10000rpm/min4℃,离心 5min,取上清,于 1cm 光径,蒸馏水调零,测定 OD485  

脱氢酶活力计

酶活位定义:

37℃时,每小时每克样品使反应体系 OD 值每增加 0.01 为一个酶活单位。 

计算公式:脱氢酶活性 (U/g ·h) = (OD485 测定-OD485 对照) ÷0.01 ÷样品质量(g) ÷反应时 (h)

注意事

1. 配制好的试剂一避光保存于 4℃ ,尽量在一周内使用,若出现红色,则不能使用。

2. 试剂三易挥发,有毒,为了您的健康,请穿实验服,戴口罩,戴乳胶手套操作。

3. 反应完成后立即冰浴以终止反应,并去除干净残留的反应液。

4. 如果测定出来的吸光值较大,需把样品适当稀释再进行测定。

5. 试剂盒 2-8℃保存。


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