产品名称:土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)测试盒
产品规格:50管/48样,100管/96样
产品货号:YX-C-B915,YX-C-B915
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价(元) |
YX-C-B915 |
土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)测试盒 |
紫外分光光度法 |
50管/48样 |
500 |
YX-W-B915 |
土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)测试盒 |
微量法 |
100管/96样 |
980 |
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品内容:
试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃避光保存;临用前加入6mL乙醇溶解。
试剂三:液体 10µL×1 瓶,4℃保存。临用前加入 5mL 蒸馏水备用。
产品说明:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系, 在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、震荡仪、甲苯、乙醇、30-50目筛(或更小)、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理:
土样自然风干,过30-50目筛。
二、测定步骤:
1、紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至310nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二用乙醇稀释10倍备用,用多少配多少。
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测定管 |
对照管 |
土样(g) |
0.03 |
0.03 |
甲苯(µL) |
15 |
15 |
室温静置15min。 |
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试剂一(µL) |
240 |
240 |
试剂二(µL) |
30 |
- |
试剂三(µL) |
15 |
- |
30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。 |
||
试剂二(µL) |
- |
30 |
试剂三(µL) |
- |
15 |
14000g 常温离心10min。取200µL上清于微量石英比色皿中或96孔UV板中测定310nm处 的吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算∆A=A测定管-A对照管。 |
三、酶活计算公式
1. 按微量石英比色皿计算:
酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(U/g)=∆A÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T= 0.538×∆A÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,0.3mL=3×10-4L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
2. 按96孔UV板计算:
酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(U/g)=∆A÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T= 0.896×∆A÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d;比色皿光径,0.6cm;V反总:反应总体积, 0.3mL=3×10-4L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
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