甘油三酯（TG）含量测定试剂盒说明书(分光光度法)

货号：LE-1-145

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。

测定原理：

用异丙醇提取 TG ，脂蛋白酯酶水解 TG 生成甘油和脂肪酸（FFA），甘油与三磷酸腺苷在甘 油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成 H2O2 ，过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林 偶联酚，生成有色化合物，在 505 nm 处有特征吸收峰。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂组成和配置：

试剂一：液体 60 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 26 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 26 mL×1 瓶，4℃避光保存。

TG 的提取：

1、组织中 TG 的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1 ：5~10 的比例（建议称取 约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，8000g ，4℃离心 10min，取上清，即 TG 待测液。

2、细胞、细菌中 TG 的提取：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清， 加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20％，超声 2s，停 1s），8000g ，4℃离心 10min， 取上清，即 TG 待测液。

3、血清（浆）样品：直接测定。

测定操作：

可见分光光度计预热 30min，调节波长到 505 nm。

混匀，室温下静置 20min，于 505 nm 波长处读取吸光值，记为 A 空白和 A 测定，△A=A 测 定-A 空白。空白管只需测一管。

计算公式：

标准曲线：y = 0.6522x - 0.0199； R² = 0.9979；x：标准品浓度（mg/mL） y：吸光值差值 ΔA。 

1、血清（浆） 中甘油三酯含量计算：

TG 含量（mg/mL）= (ΔA+0.0199）÷0.6522=1.533×(ΔA+0.0199）

2、组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算：

（1）按样本蛋白浓度计算

TG 含量（mg/ mg prot）= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V 样÷(Cpr×V 样）

=1.533×(ΔA+0.0199）÷Cpr

（2）按样本质量计算

TG 含量（mg/ g  鲜重）=(ΔA+0.0199）÷0.6522×V 样÷(W×V 样÷V 样总）

=1.533×(ΔA+0.0199）÷W

V 样：加入样本体积，0.01 mL；V 样总：加入试剂一体积，1 mL；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL。

注意事项：

1、试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖 紧。

2、最低检出限为 100μg/mL。