产品名称：果糖-1,6-二磷酸(FDP)测试盒
产品规格：50管/24样,100管/48样
产品货号：LE-1-237,LE-2-237
产品报价：
免费咨询：0551-66107970
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货号 |
产品名称 |
检测方法 |
规格 |
售价（元） |
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LE-1-237 |
果糖-1,6-二磷酸(FDP)测试盒 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
1800 |
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LE-2-237 |
果糖-1,6-二磷酸(FDP)测试盒 |
微量法 |
100管/48样 |
3500 |
果糖-1,6-二磷酸（FDP）试剂盒说明书（可见分光光度法）
测定意义
果糖 1,6-二磷酸是机体内的高能代谢物和代谢调控剂，是糖酵解途径的重要中间体，广泛存在于动植物和微生物体内，能影响细胞内钾离子的浓度，改善葡萄糖和其他能量底物的代谢， 促进组织氧的释放，广泛应用于临床医药制剂。
测定原理
醛缩酶催化果糖 1,6-二磷酸降解，产物与 DNPH 缩合成紫红色物质，在 540nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、恒温水浴锅、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制
试剂一：液体 65mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 1mL×1 支，4℃避光保存。
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体 40mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理
1、组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。
2、细胞：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清待测。
3、液体：直接检测。
测定操作
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对照管 |
测定管 |
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样品（μL） |
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100 |
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蒸馏水（μL） |
100 |
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试剂一（μL） |
220 |
200 |
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试剂二（μL） |
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20 |
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充分混匀，37℃反应 30min |
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试剂三（μL） |
200 |
200 |
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充分混匀，37℃温育 10min |
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试剂四（μL） |
800 |
800 |
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充分混匀，于 37℃温育 10min，于 1mL 玻璃比色皿，蒸馏水调零， 测定 540nm 处吸光值，记为 A 对照管和 A 测定管，△A=A 测定管-A对照管，对照管只要做一管。
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计算公式
标准曲线：y= 0.6971x+0.0012，R2=0.9983
1、按照质量计算
FDP（mg/g 鲜重）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（W÷V 样总）
= 1.43×(△A-0.0012)÷W
2、按照细胞数量计算
FDP（mg/104 cell）= (△A-0.0012) ÷0.6971÷（细胞数量÷V 样总）
= 1.43×(△A-0.0012)÷细胞数量
3、按照液体体积计算
FDP（mg/mL）= (△A-0.0012) ÷0.6971
= 1.43×(△A-0.0012)
W：样本质量，g；V 样总：加入提取液体积，1mL
注意事项：最低检出限为 1.72 mg/L。
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