欢迎来合肥莱尔生物科技有限公司!我们将为您提供周到的服务!销售热线:0551-66107970 15375214453
为更好查询产品,请搜索中英文简称,如丙二醛(MDA)试剂盒,搜索”丙二醛”或”MDA”
联系我们Contact us
公司名称:合肥莱尔生物科技有限公司
联系人:陈经理
固话:0551-66107970
手机:15375214453
地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号

产品名称:酸性磷酸酶(ACP)测试盒

产品规格:50管/24样,100管/48样

产品货号:LE-1-363,LE-2-363

产品报价:

免费咨询:0551-66107970

发邮件给我们:737388448@qq.com

分享到:

 

货号

产品名称

检测方法

规格

售价(元)

LE-1-363

酸性磷酸酶(ACP)测试盒

可见分光光度法

50/24

140

LE-2-363

酸性磷酸酶(ACP)测试盒

微量法

100/48

270

酸性磷酸酶(ACP)活性测定试剂盒说明书(可见分光光度法

测定意义:

ACP  在酸性条件下催化磷酸单酯水解称无机磷酸,常见于巨噬细胞的溶酶体内。ACP 常用于前列腺癌的辅助诊断。

测定原理:

在酸性环境中,ACP 催化对硝基苯磷酸二钠水解生成 4-硝基苯酚,在 405nm 有特征光 吸收;通过测定 405nm 吸光度增加速率,来计算 ACP 活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、分析天平、可调式移液器、1mL  玻璃比色皿、冰、可 调式移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。 

试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。 

试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。 

粗酶液提取:

1.    组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1 :5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,4℃ 、10000g 离心 10min ,取上清液待测。

2.    细菌或细胞:按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000 :1  的比 例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒, 间隔 7 秒,总时间3min);然后 10000g ,4℃,离心 10min ,取上清置于冰上待测。

3.    血液可直接测定,或者适当稀释后测定。 

测定:

1.  分光光度计预热 30 min,调节波长到 405 nm。

2.   EP  管中加入下列试剂

试剂名(μL

测定管

对照管

样本

10

10

试剂一

90

990

试剂二

900

 

30℃避光保温 30 min

试剂三

400

400

混匀,吸取 1 mL  加入玻璃比色皿中,405 nm  下测定各管吸光值。ΔA=A 测定管-A 对照管

注意:每个测定管需做一个对照管。

ACP 活性计算:

标准曲线 y = 14.6672x + 0.0179;R2  = 0.9996;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值 ΔA。

1、血液中 ACP 活性计算

活性单位定义:30℃中每毫升血液每分钟催化产生 1μmol 4-硝基苯酚定义为 1 个酶活单位。

ACP 活力(μmol/min/mL)=  (ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V 反总÷T÷V 样 = 0.2273 × (ΔA-0.0179)

2、组织、细菌或细胞中 ACP 活性计算

(1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:30℃中每毫克蛋白每分钟催化产生 1 μmol 4-硝基苯酚定义为 1 个酶活单位。 

ACP 活力(μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V 反总÷T÷(V 样×Cpr)

=0.2273 × (ΔA-0.0179)÷Cpr

(2)按照样本质量计算

活性单位定义:30℃中每克组织每分钟催化产生 1 μ mol 4-硝基苯酚定义为 1 个酶活单位。

ACP 活力 (μmol/min/g  鲜重)=(ΔA-0.0179)÷14.6672×V 反总÷T÷(W×V  样÷V  样总)

= 0.2273 × (ΔA-0.0179)÷W

(3)按照细菌或细胞数量计算

活性单位定义:30℃中每 10个细菌或细胞每分钟催化产生 1 μ mol 4-硝基苯酚定义为 1 个 酶活单位。

ACP 活力 (μmol/min/104  cell)=(ΔA-0.0179)÷14.6672 ×V 反总÷T ÷(细胞数量×V  样÷V  样总) = 0.2273 × (ΔA-0.0179)÷细胞数量

V 反总:反应体系总体积(mL),1 mL W  :样品质量,g V 样:加入反应体系中样本 体积(mL),0.01 mL;V 样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间(min),30 min;500: 细胞或细菌总数,500 万。

注意事项:

ACP 不稳定,尤其在 37℃和 pH 大于 7 的条件下活力丧失快,因此酸性磷酸酶样品一般需 当天准备;血清样品中,每毫升血清中加入 10mg 柠檬酸氢二钠或者 5mg 硫酸氢钠,使 pH 降至 6.5 以下,或 5ml 血清加入 30%醋酸溶液2~3滴,置于 4℃可保存 1 周。


 相关新闻:
全国统一客服电话:

0551-66107970

地址:合肥市包河经济开发区花园大道17号
合肥市双凤经济开发区金珠路合肥莱尔生物科技有限公司2楼1515室
联系人:陈经理
手机号码:15375214453
固定电话:0551-66107970
公司网址:www.laier-bio.com

版权所有 © 合肥莱尔生物科技有限公司  皖ICP备17006278号-2

在线客服
在线客服
用心服务 成就你我