货号：LE-1-331

正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。  

产品内容：

提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。 

试剂一：粉剂 1 瓶，4℃避光保存，使用前加15mL 蒸馏水溶解。 

试剂二：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。 

工作液：临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1 混合。使用前37℃温育2min。 

产品说明： 

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中，能可逆地催化肌酸与ATP 之间的转磷酰基反应，在能量运转、肌肉收缩和ATP 再生中有重要作用，是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。 CK 催化磷酸肌酸和ADP 生成肌酸和ATP，己糖激酶催化ATP 与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖， 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH，导致340nm 光吸收值增加。 

自备实验用品及仪器： 

天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿和蒸馏水。 

操作步骤：

一、 粗酶液提取 

1. 组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心15min，取上清，置冰上待测。 

2. 血清样本：直接测定。 

二、 测定操作表

三、 CK 活性计算公式

1、按组织蛋白含量计算

酶活定义：37℃，pH7.0 时，每毫克蛋白质1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。

CK 活性（nmol/min / mg prot）=△A ÷（e×d）×V 反总÷(V 样×Cpr)= 804×△A÷Cpr

2、按组织样本质量计算：

酶活定义：37℃，pH7.0 时，每克样品1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。

CK 活性（nmol/min /g）= △A ÷（e×d）×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= 804×△A÷W

3、按血清计算：

酶活定义：37℃，pH7.0 时，每升血清1min 内催化产生1nmol NADPH 为一个酶活单位。

CK 活性（nmol/min /L）= △A ÷（e×d）×V 反总÷V 样×1000= 804000×△A

e：NADPH 微摩尔消光系数，6.22×10^-3 L/μmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应体系总体积，1mL；V 样：反应体系中样本体积，0.2mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。

注意事项：

1. 配制好的工作液4℃稳定7 天，请尽量配制后尽快使用。

2. 血清的CK 不稳定，采集样本后尽快测定，4℃避光保存可稳定24h。

3. 样品蛋白质含量需要另外测定，可选用BCA 蛋白含量测定试剂盒进行测定。

4. OD 值大于0.5 可用提取液适当稀释样品，并在计算公式中相应的改变稀释倍数。