植物硝态氮试剂盒说明书（分光光度法）

货号：LE-1-308

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况，可作为 土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且 对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

测定原理

在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12） 呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。

自备实验用品及仪器

蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。

试剂组成和配制

试剂一：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加 2mL 浓硫酸充分溶解。

试剂二：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 支，4℃保存。

样本处理

组织样本：按照质量（g）： 蒸馏水体积(mL)为 1 ：5~ 10 的比例（建议称取约 0. 1g ，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，室温匀浆后置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min ，期间不断晃动 或者置于 90℃恒温摇床中振荡提取 30min ，待冷却后于 25℃ , 12000g 离心 15min ，取上清 待测。（深色植物匀浆后加入约 3mg 试剂三后再提取）

液体样本：直接检测。 

测定操作表

注意：空白管只需测定一次。 

计算公式

标准曲线：y=0.0156x+0.0073 ，R² =0.9997

NO3—— N 含量 (μg/mL）=(△A-0.0073）÷ 0.0156 

=64.1 ×(△A-0.0073）

NO3—— N 含量（mg/kg 鲜重）=(△A-0.0073）÷ 0.0156÷（W÷V 样总） 

=64.1 ×(△A-0.0073）÷W

V 样总：加入提取液体积，1mL ，W：样本质量，g

注意事项

1、试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。

2、试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。

3、最低检出限为 2μg/g。