试剂一：液体 3.5 mL×1 瓶，4℃保存； 

试剂二：液体 3.5 mL×1 瓶，4℃保存； 

试剂三：液体 30 mL×1 瓶，4℃保存；
标准品：液体 1mL×1 支，20μmol/mL 丙酮酸钠标准品，4℃保存。
产品说明：
GOT（ 2.6.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化可逆转氨基反应，是氨基酸代谢的重要酶。此外，GOT 在心肌细胞中含量最高，临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
GOT 催化 α-酮戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸；丙酮酸可与 2,4-二硝基苯肼反应生成 2,4-二硝基苯腙，在碱性条件下显棕红色；测定 505nm 吸光度的变化，即可计算 GOT 酶活力。
试验需自备的仪器和用品：
可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品测定的准备
1、 细胞或细菌样品的制备 ：
先收集细胞或细菌样品到离心管内，弃上清，按照每 500 万细胞或细菌加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）。3500g，4℃离心 10min，取上清， 置冰上待测。
2、组织：
称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进冰浴行匀浆。3500g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。

二、测定操作表
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 505nm，蒸馏水调零。
2、首先将标准品稀释至 2μmol/mL，按下表 混合标准品和试剂一得到相应浓度的标准管：

注：0μmol/mL 标准管为空白管。
三、计算
1、标准曲线的绘制：
以各标准溶液浓度为 x 轴，以∆A（A 标准管-A 空白管）为 y 轴做标准曲线，得到方程 y=kx+b。将（A 测定管-A 对照管）带入方程求 x 值。
2、GOT 活性计算：
（1） 按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每 g 鲜重样品催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。
GOT（U/g 鲜重）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（W×V 样本÷V 样总）÷T=12x÷W。
（2） 按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每 mg 组织蛋白催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。
GOT（U/mg prot）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（Cpr×V 样本）÷T=12x÷Cpr。
（3） 按血清（浆）体积计算：
单位定义：每小时每 mL 血清样品催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。
GOT（U/ mL）=x×（V 样本+V 试剂一）÷V 样本÷T=12x。
（4） 按细菌或细胞数量计算：
单位定义：每小时每 104 细菌或细胞催化产生 1μmol 丙酮酸的量为一个 GOT 活力单位。
GOT（U/104cell）=x×（V 样本+V 试剂一）÷（500÷V 样总×V 样本）÷T=0.024x。
V 样本：吸取样本体积，0.005mL；V 试剂一：吸取试剂一体积，0.025mL；V 样总：吸取提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；T：反应时间，0.5h；500：细胞数量，500 万个。